產品名稱：SMMC-7721/DDP人肝癌順鉑耐藥株細胞 培養步驟 含STR鑒定

細胞污染： HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

細胞傳代步驟： 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞復蘇步驟： 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟： 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

SMMC-7721/DDP人肝癌順鉑耐藥株細胞 培養步驟 含STR鑒定

(SMMC-7721細胞)人肝癌細胞分化的特點主要可以概括成三點：

① 持久性:細胞分化貫穿于生物體整個生命進程中,在胚胎期達到*程度

② 穩定性和不可逆性:一般來說,分化了的細胞將一直保持分化后的狀態,直到死亡

③ 普遍性:生物界普遍存在,是生物個體發育的基礎

(SMMC-7721細胞)人肝癌細胞

培養條件

RPMI164010%FBS

細胞生長：貼壁生長

細胞形態：上皮樣

細胞數量：1×106個細胞數

細胞傳代：1：3傳代3~4天1次

細胞特性：取人肝癌組織采用靜置和旋轉管法培養11天細胞開始生長*傳代23天。AFP陽性。用Northernblot方法未能檢測到細胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表達免疫缺陷小鼠體內可成瘤

細胞純度：94％

細胞活力：90％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

細胞凍存：液氮凍存（基礎培養基+10%DMSO+20%FBS）

細胞運輸：干冰運輸（1Vial）或活細胞運輸（T-25flasks）

細胞用途：只可用于科研不可用于臨床診斷和治療

(SMMC-7721細胞)人肝癌細胞可以用大量次培養基培養，來自sciencell、ICLC、ATCC等細胞庫。從胚胎提取，于原代（或二代）凍存在液氮中，一律采用干冰運輸。客戶收到細胞后，從干冰中取出放入液氮中保存，待實驗安排好后，解凍后即可以進行復蘇培養。