色譜技術是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。
對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。
關于色譜柱的安裝、維護、保存以及由色譜柱導致的這樣那樣的色譜故障也是一門學問。
菲羅門糖柱的正確使用包含:加裝保護柱,過濾流動相和樣品,凈化樣品,避免過高的柱壓,注意溫度和酸堿度,正確及時的沖洗等。
菲羅門糖柱怎樣正確沖洗?
開始試驗前,應了解柱中當前是何種溶劑。對于新色譜柱,如無特殊說明均為評價報告中所用流動相。
柱中當前溶劑一定要與分析樣品所用流動相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過渡。
異丙醇是能與各種溶劑混溶的試劑,可作為中介流動相使用。
反相鍵合硅膠柱適宜的保存環境是純甲醇,如分析用流動相為緩沖液2有機溶劑,可先用較低甲醇含量(<20%)的甲醇2水置換掉原來的純甲醇,再進分析用流動相,以防止在柱內發生鹽的沉淀;試驗結束后,要及時用適當的溶劑沖洗系統并終過渡到純甲醇沖洗,對于含有緩沖鹽的流動相,辦法是先用與分析用流動相組成*相同但不含緩沖鹽的溶液進行沖洗,再逐步過渡到純甲醇沖洗。
多數沖洗液體積大約為柱容積的15~20倍,但終要以基線是否平直、壓力是否穩定決定。有些廠家的色譜柱標明了流動相中有機相的較低使用濃度為≥5%,使用時應給予注意。
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