本方法(Prionics-check PrioSTRIP)由瑞士PrionicsAG公司開發研制,是一種快速簡單的試紙條式免疫色譜檢測方法,2004年通過歐盟認證。該方法的原理是制備腦組織勻漿,用蛋白酶K處理,然后與標記有PrP單克隆抗體的乳膠顆粒孵育,zui后用試紙條直接檢測孵育后的溶液。根據試紙條上出現的顏色條帶來判定實驗結果。
本方法的敏感性和特異性均為100%,整個反應在3h內可以完成。
瘋牛病PrioSTRIP試紙條檢測法的主要步驟如下。
(1)樣品準備 取腦閂部組織,勻漿,然后將勻漿液加入到96孔分析板中。
(2)消化 往分析板中加入PK酶消化液,使正常的PrP蛋白質*消化掉,而瘋牛病病原則保留下來。
(3)孵育 將消化完的樣品轉移到檢測板,加入PrP抗體,該抗體結合有藍色乳膠顆粒。
(4)檢測 將梳形試紙條插入檢測板中的液體里,待20min。
(5)分析結果 在陽性對照出現正常結果的情況下,如果試紙條出現一個條帶,則該樣品為瘋牛病陰性,如果出現兩個條帶則該樣品為BSE陽性。實驗結果也可用的儀器讀數并分析。
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