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TMB底物顯色試劑盒(可溶型)說明書

來源:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司   2020年02月16日 22:04  

TMB底物顯色試劑盒(可溶型)說明書

 

Soluble TMB Kit

目錄號:K0050

保存條件:2-8℃保存。

 

 

組分說明

 

                Cat No.            K0050

                Volume             100 ml

                 TMB              5 ml

                 TMB-顯色液          100 ml

 

 

產(chǎn)品簡介

 

  TMB (3', 3', 5', 5', -四甲基聯(lián)苯胺)是辣根過氧化物酶(HRP)的顯色底物,是目

前HRP系統(tǒng)ELISA實驗的常用顯色試劑。TMB顯色底物工作液在HRP的催化下,形成藍(lán)色的陽離子產(chǎn)物,在370 nm和652 nm處有主要吸收峰。加酸終止反應(yīng)后,藍(lán)色轉(zhuǎn)變為黃色,可以在450 nm波長下測定。本試劑盒使用方便,靈敏度高,效果穩(wěn)定,顏色產(chǎn)物為可溶性,適用于ELISA,不推薦用于IHC實驗。

 

 

                本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途

 

注意事項

 

    1.顯色工作液應(yīng)即用即配,放置超過10 min會影響顯色效果。

    2.TMB顏色底物顯色后,隨著時間的延長,顏色會逐漸消退,因此顯色并終止反應(yīng)后

     應(yīng)盡快讀值,否則會影響檢測的準(zhǔn)確性。

    3.以96孔酶標(biāo)板每孔用量100 μl顯色工作液計算,5 ml 20×TMB Kit 可完成1000孔樣品的檢測。

    4.本產(chǎn)品僅限于科研,不能用于人體實驗或人體治療。

 

    操作步驟

 

    1.TMB顯色工作液配制:

       根據(jù)實驗需用量,將TMB和TMB-顯色液以1:19的比例均勻混合,即配制成為TMB顯色工作液。

    2.顯色:

       1)經(jīng)HRP標(biāo)記物孵育并充分洗滌后,酶標(biāo)板每孔中加100 μl TMB顯色工作液。

       2)室溫避光孵育25-30分鐘,反應(yīng)產(chǎn)物呈藍(lán)色。

       3)每孔加50 μl 0.5M H2SO4 終止顯色,此時藍(lán)色產(chǎn)物變?yōu)榱咙S色。

       4)將酶標(biāo)板置于酶標(biāo)儀中,450 nm波長下讀取數(shù)據(jù)。

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