液相色譜系統的許多問題都能在譜圖上反映出來。其中有一些問題可以通過改變設備參數得到解決；而有些問題必須通過修改操作程序來解決。本文匯總了一些關于液相色譜圖譜問題的解決辦法，這些辦法也許能更有效的幫你解決問題。

1峰拖尾   

原因和解決方法

1、篩板阻塞

a、反沖色譜柱 

b、更換進口篩板 

c、更換色譜柱
 

2、色譜柱塌陷

填充色譜柱
 

3、干擾峰

a、使用更長的色譜柱
b、改變流動相或更換色譜柱
 

4、流動相PH選擇錯誤

調整PH值。對于堿性化合物，低PH值更有利于得到對稱峰
 

5、樣品與填料表面的溶化點發生反應

a、加入離子對試劑或堿性揮發性修飾劑
b、更改色譜柱

2峰前延

原因和解決方法

1、柱溫低

升高柱溫
 

2、樣品溶劑選擇不恰當

使用流動相作為樣品溶劑
 

3、樣品過載

降低樣品含量
 

4、色譜柱損壞

更換色譜柱

3峰分叉

原因和解決方法

1、 保護柱或分析柱污染

取下保護柱再進行分析。如果必要更換保護柱。如果分析柱阻塞，拆下來清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強保留物質污染，運用適當的再生措施。如果問題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。
 

2、樣品溶劑不溶于流動相

改變樣品溶劑。如果可能采取流動相作為樣品溶劑。

4峰變形

原因和解決方法

1、樣品過載

減少樣品載量

5早出的峰變形

原因和解決方法

1、樣品溶劑選擇不恰當

a、減少進樣體積
b、運用低極性樣品溶劑

6早出峰拖尾程度大于晚出峰

原因和解決方法

1、柱外效應

a、調整系統連接（使用更短、內徑更小的管路）
b、使用小體積的流通池

7K’增加時，脫尾更嚴重

原因和解決方法

1、二級保留效應，反相模式

a、加入三乙胺（或堿性樣品）
b、加入乙酸（或酸性樣品）
c、加入鹽或緩沖劑（或離子化樣品）
d、更換一支柱子 

2、二級保留效應，正相模式

a、加入三乙胺（或堿性樣品）
b、加入乙酸（或酸性樣品）
c、加入水（或多官能團化合物）
d、試用另一種方法
 

3、二級保留效應，離子對

加入三乙胺（或堿性樣品）

8酸性或堿性化合物的峰拖尾

原因和解決方法

1、緩沖不合適

a、使用濃度50-100mM的緩沖液
b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液

9額外的峰

原因和解決方法

1、樣品中有其他組份

2、前一次進樣的洗脫峰

a、增加運行時間或梯度斜率
b、提高流速

3、空位或鬼峰

a、檢查流動相是否純凈
b、使用流動相作為樣品溶劑
c、減少進樣體積

10保留時間波動

原因和解決方法

1、溫控不當

調好柱溫

2、流動相組分變化

防止變化（蒸發、反應等）
 

3、色譜柱沒有平衡

在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱

11保留時間不斷變化

原因和解決方法

1、流速變化

重新設定流速
 

2、泵中有氣泡

從泵中除去氣泡
 

3、流動相選擇不恰當

a、更換合適的流動相
b、選擇合適的混合流動相

12基線漂移

原因和解決方法

1、柱溫波動

控制好柱子和流動相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器
 

2、流動相不均勻

（流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導致的漂移。）
使用HPLC級的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣，使用中使用氦氣。
 

3、流通池被污染或有氣體

用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用鹽酸）
 

4、檢測器出口阻塞

（高壓造成流通池窗口破裂，產生噪音基線）
取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗。
 

5、流動相配比不當或流速變化

更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。
 

6、柱平衡慢，特別是流動相發生變化時

用中等強度的溶劑進行沖洗，更改流動相時，在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。
 

7、流動相污染、變質或由低品質溶劑配成

檢查流動相的組成。使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑
 

8、樣品中有強保留的物質（高K’值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現出一個逐步升高的基線。

使用保護柱，如有必要，在進樣之間或在分析過程中，定期用強溶劑沖洗柱子。
 

9、使用循環溶劑，但檢測器未調整

重新設定基線。當檢測器動力學范圍發生變化時，使用新的流動相。
 

10、檢測器沒有設定在大吸收波長處

將波長調整至大吸收波長處
 

13基線噪音（規則的）

原因和解決方法

1、在流動相、檢測器或泵中有空氣

流動相脫氣。沖洗系統以除去檢測器或泵中的空氣。
 

2、漏液

檢查管路接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換泵密封。
 

3、流動相混合不*

用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑
 

4、溫度影響（柱溫過高，檢測器未加熱）

減少差異或加上熱交換器
 

5、在同一條線上有其他電子設備

斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自于外部，加以更正。
 

6、泵振動

在系統中加入脈沖阻尼器
 

14基線噪音

原因和解決方法

1、 漏液

檢查接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換密封。檢查流通池是否漏液。
 

2、流動相污染、變質或由低質溶劑配成

檢查流動相的組成。
 

3、流動相各溶劑不相溶

選擇互溶的流動相
 

4、檢測器/記錄儀電子元件的問題

斷開檢測器和記錄儀的電源，檢查并更正。
 

5、系統內有氣泡

用強極性溶液清洗系統
 

6、檢測器內有氣泡

清洗檢測器，在檢測器后面安裝背景壓力調節器
 

7、流通池污染

（即使是極少的污染物也會產生噪音。）
用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流通池
 

8、檢測器燈能量不足

更換燈
 

9、色譜柱填料流失或阻塞

更換色譜柱
 

10、流動相混合不均勻或混合器工作不正常

維修或更換混合器，在流動相不走梯度時，建議不使用泵的混合裝置
 

15寬峰

原因和解決方法

1、流動相組成變化

重新制備新的流動相
 

2、流動相流速太低

調節流速
 

3、漏液（特別是在柱子和檢測器之間）

檢查接頭是否松動、泵是否漏液、是否有鹽析出以及不正常的噪音。如果必要更換密封。
 

4、檢測器設定不正確

調整設定
 

5、柱外效應影響

a、柱子過載
b、檢測器對反應時間或池體積響應過大
c、柱子與檢測器之間的管路太長或管路內徑太大
d、記錄儀響應時間太長
 

6、緩沖液濃度太低

增加濃度
 

7、保護柱污染或失效

更換保護柱
 

8、色譜柱污染或失效，塔板數較低

更換同樣類型的色譜柱。如果新柱子可以提供對稱的色譜峰，則用強溶劑沖洗舊柱子。
 

9、柱入口塌陷

打開柱入口，填補塌陷或更換柱子
 

10、呈現兩個或多個未被*分離的物質的峰

選擇其它類型的色譜柱以改善分離效果
 

11、柱溫過低

提高柱溫。除非特殊情況，溫度不宜超過75℃
 

12、檢測器時間常數太大

使用較小的時間常數
 

16分離度降低

原因和解決方法

1、流動相污染或變質（引起保留時間變化）

重新配置流動相
 

2、保護柱或分析柱阻塞

去掉保護柱進行分析。如果必要則更換保護柱。如果分析柱阻塞，可進行反沖。如果問題仍然存在色譜柱可能被強保留的污染物損壞，建議使用恰當的再生程序。如果問題仍然存在，進口可能阻塞了，更換入口處的篩板或更換色譜柱。
 

17所有的峰面積都太小

原因和解決方法

1、檢測器衰減設定過高

減少衰減的設定
 

2、檢測器時間常數設定太大

設定較小的時間常數
 

3、進樣量太少

增大進樣量
 

4、記錄儀連接不當

使用正確的連接
 

18所有的峰面積都太大

原因和解決方法

1、檢測器衰減設定過低

采取較大的衰減
 

2、進樣過多

減少進樣量
 

3、記錄儀連接不正確

正確連接記錄儀