色譜分析的重要作用之一是對(duì)樣品定量。而色譜法定量的依據(jù)是：組分的重量或在載氣中的濃度與檢測(cè)器的響應(yīng)信號(hào)成正比。常見(jiàn)定量分析方法分為面積歸一化法、內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法等。大家常用的是內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法。今天給大家說(shuō)一說(shuō)內(nèi)標(biāo)法怎么用。

內(nèi)標(biāo)法是選一與欲測(cè)組分相近但能*分離的組分做內(nèi)標(biāo)物（當(dāng)然是樣品中沒(méi)有的組分），然后配制欲測(cè)組分和內(nèi)標(biāo)物的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣得相對(duì)校正因子。再將內(nèi)標(biāo)物加入欲測(cè)組分的樣品中，進(jìn)樣后測(cè)得欲測(cè)組分和內(nèi)標(biāo)物的定量參數(shù)，用內(nèi)標(biāo)法公式計(jì)算即可。

而外標(biāo)法就是用標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積或峰高與其對(duì)應(yīng)的濃度做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，測(cè)出樣品的峰面積或峰高，在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出其對(duì)應(yīng)的濃度，這是常用的一種定量方法；內(nèi)標(biāo)法是對(duì)應(yīng)外標(biāo)法說(shuō)的，內(nèi)標(biāo)法是將一定量的純物質(zhì)作內(nèi)標(biāo)物，加入到準(zhǔn)確稱(chēng)量的試樣中，根據(jù)被測(cè)試樣和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量比及其相應(yīng)的色譜峰面積之比，來(lái)計(jì)算被測(cè)組分的含量。

內(nèi)標(biāo)法的關(guān)鍵是選擇合適的內(nèi)標(biāo)物。選擇內(nèi)標(biāo)物的標(biāo)準(zhǔn)：

• 內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是原樣品中不存在的純物質(zhì)。
• 該物質(zhì)的性質(zhì)應(yīng)盡可能與欲測(cè)組分相近，不與被測(cè)樣品起化學(xué)反應(yīng)。
• 能*溶于被測(cè)樣品中
• 內(nèi)標(biāo)物的峰應(yīng)盡可能接近欲測(cè)組分的峰，或位于幾個(gè)欲測(cè)組分的峰中間，但必須與樣品中的所有峰不重疊，即*分開(kāi)。

內(nèi)標(biāo)法的優(yōu)點(diǎn)：進(jìn)樣量的變化，色譜條件的微小變化對(duì)內(nèi)標(biāo)法定量結(jié)果的影響不大，特別是在樣品前處理（如濃縮、萃取，衍生化等）前加入內(nèi)標(biāo)物，然后再進(jìn)行前處理時(shí)，可部分補(bǔ)償欲測(cè)組分在樣品前處理時(shí)的損失。若要獲得很高精度的結(jié)果時(shí)，可以加入數(shù)種內(nèi)標(biāo)物，以提高定量分析的精度。

內(nèi)標(biāo)法的缺點(diǎn)：選擇合適的內(nèi)標(biāo)物比較困難，內(nèi)標(biāo)物的稱(chēng)量要準(zhǔn)確，操作較麻煩。使用內(nèi)標(biāo)法定量時(shí)要測(cè)量欲測(cè)組分和內(nèi)標(biāo)物的兩個(gè)峰的峰面積（或峰高），根據(jù)誤差疊加原理，內(nèi)標(biāo)法定量的誤差中，由于峰面積測(cè)量引起的誤差是標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法定量的2-2是由于進(jìn)樣量的變化和色譜條件變化引起的誤差，內(nèi)標(biāo)法比標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法要小很多，所以總的來(lái)說(shuō)，內(nèi)標(biāo)法定量比標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法定量的準(zhǔn)確度和精密度都要好。