液相色譜法（HPLC）具有高壓、、高速、高靈敏度、高選擇性等特點，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、環(huán)保、石化、食品、化工等行業(yè)，是現(xiàn)在分離分析的重要方法。

HPLC是集成化很高的儀器。有五大系統(tǒng)構(gòu)成：動力系統(tǒng)，進樣系統(tǒng)，分離系統(tǒng)，檢測系統(tǒng)，數(shù)據(jù)分析和記錄系統(tǒng)構(gòu)成。
其中：
動力系統(tǒng)：泵
進樣系統(tǒng)：六通閥和進樣針，或者自動進樣器
分離系統(tǒng)：色譜柱
檢測系統(tǒng)：檢測器，一般有紫外檢測器，熒光檢測器，示差折光檢測器，MS檢測器等等。
記錄系統(tǒng)：電腦工作站等
連接這些設(shè)備的都是由一根根不銹鋼管或者PEEK管構(gòu)成。

HPLC日常操作注意事項：

選擇流動相時應(yīng)注意的幾個問題：

1、盡量使用高純度試劑作流動相，防止微量雜質(zhì)長期累積損壞色譜柱和使檢測器噪聲增加。

2、避免流動相與固定相發(fā)生作用而使柱效下降或損壞柱子。

3、試樣在流動相中應(yīng)有適宜的溶解度，防止產(chǎn)生沉淀并在柱中沉積。

4、流動相同時還應(yīng)滿足檢測器的要求。當使用紫外檢測器時，流動相不應(yīng)有較強的紫外吸收，一般檢測波長應(yīng)大于流動相的截止波長。

泵的維護保養(yǎng)：

1、防止任何固體微粒進入泵體，否則會磨損柱塞、密封環(huán)缸體和單向閥，因此應(yīng)預(yù)先對流動相進行過濾，可采用Millipore濾膜(0．22μm或 0．45μm )等過濾。泵的入口都應(yīng)該連接砂濾棒(或片)， 輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常更換。

2、流動相不應(yīng)含有任何腐蝕性物質(zhì)， 含有緩沖液的流動相不應(yīng)保留在泵內(nèi)， 尤其是停泵過夜或更長時間。分析工作結(jié)束后必須用純水充分清洗后，再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合固定相，可以是甲醇或甲醇和水)

3、泵工作時要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動相用完，否則空泵運轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、密封環(huán)或缸體，終產(chǎn)生漏液。

4、輸液泵的工作壓力不要超過規(guī)定的高壓力，否則會使高壓密封環(huán)變形，產(chǎn)生漏液。

 

紫外檢測器維護保養(yǎng)：

1、流通池進入氣泡會干擾基線，并極難排出，應(yīng)使用充分脫氣的流動相，以減少氣泡的產(chǎn)生。

2、應(yīng)定期沖洗系統(tǒng)，避免流通池干涸。

3、檢測器中氘燈( 光源) 隨著使用時間的增加，氘燈強度降低，噪音會不斷增大，故分析前柱平衡得差不多時，再打開檢測器，分析工作結(jié)束及時關(guān)閉檢測器（頻繁開關(guān)檢測器也會縮短檢測器壽命，一般開啟間隔少于4小時，不建議關(guān)閉檢測器）。 

4、塵埃在靜電的作用下容易覆蓋在光學(xué)元件上， 使光傳播效率降低，增加了光散射， 影響分析效果， 因此檢測器周圍的環(huán)境應(yīng)保持清潔。