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DCS細胞|DCS小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞

來源:上海琛藝實業有限公司   2019年10月21日 09:44  

·         產品名稱: DCS細胞|DCS小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞

·         產品編號: CL0028

·         細胞數量: 1*10^6

·         細胞來源: atcc

·         組織來源: 胸主動脈平滑肌

·         細胞種屬: 大鼠源

·         生長特性: 貼壁

·         培養基: DMEM+10%FBS

·         形態特征: 成纖維細胞

·         傳代方法: 1:2 - 1:3

·         培養條件: 胎牛血清至終濃度為10%。環境:空氣,95%;二氧化碳(CO2),5%;溫度,37℃

·         細胞描述: 當培養物達到穩定期時,細胞表現出酶肌激酶和肌酸磷酸激酶(CPK)的活性增加。 肌肉型CPK在細胞分裂停止后合成。

·         細胞凍存: 液氮凍存(凍存液基礎培養基+20%FBS+10%DMSO)

·         細胞運輸: 干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25瓶)

DCS細胞|DCS小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞-細胞操作說明
請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。
一、 收貨
<1>本公司細胞發貨有四種形式:T25瓶、離心管、血清及干冰。
① T25是用T25細胞培養瓶直接發貨的形式。收到細胞后,拆開包裝T25瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養基取出裝好備用,如細胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6mL培養基放回培養箱繼續培養即可。
② 離心管是用15mL離心管發貨的方式,只用于懸浮細胞發貨。收到細胞后消毒處理及平衡參考上述T25瓶。平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細胞,棄上清,用新的培養基重懸細胞并接種至培養瓶或皿中,放回培養箱繼續培養。
③ 血清是用牛血清直接發貨的形式,是細胞凍存管加入含有細胞的牛血清的形式。收到細胞后,拆開自封袋,凍存管表面噴75%酒精消毒后,在超凈臺中打開凍存管,將細胞用1mL槍頭輕輕幾次以將細胞吹勻,接種至含有預熱的培養基的培養瓶或皿中,顯微鏡下觀察細胞是否吹勻,如果沒有吹勻,繼續吹勻至3-5個細胞一團,放回培養箱繼續培養。
④ 干冰是用本公司凍存液凍存細胞后,直接用干冰將凍存的細胞冷凍發貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
<2>相關問題
① 如不能在收到細胞后及時操作細胞,T25及離心管發貨的細胞可以消毒后在37度過夜,血清發貨的細胞可以在室溫下靜置1-2天(注意不要放冰箱),干冰發貨的可以在確認干冰未*升華時將細胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰*升華,請即刻復蘇細胞。
② T25瓶及離心管在培養箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養箱環境,同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁,此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞,可以收集上清后離心(1200rpm,5min)后,將沉淀用新的培養基重懸后接種至新的培養瓶或皿中。
③ 部分細胞在運輸過程中,由于不斷震蕩及環境不適,可能導致細胞破碎死亡,從而使培養基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質。這種情況下,平衡后,貼壁細胞用PBS洗兩遍在加新的培養基培養或者傳代至新瓶中培養即可;懸浮細胞可以離心(1000rpm,3min)收集細胞,并用PBS重懸后再離心一次,再用新的培養基重懸并接種細胞。

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