恒溫搖床在蛋白質免疫反應中的應用:
① 封閉:將轉膜后的PVDF膜浸沒在5%脫脂奶粉封閉液中封閉,搖床 50~60轉, 2 小時(室溫)。
② 一抗孵育:根據抗體說明書選擇適當濃度稀釋抗體,將稀釋好的抗體加入抗體孵育盒,并將PVDF膜放入其中,搖床50~60轉,4℃孵育過夜。次日取出,TBST洗膜(3次/15 min,60轉)。
③ 二抗孵育:將二抗稀釋為合適的濃度,PVDF膜放入稀釋的二抗工作液中,室溫孵育1小時,搖床80轉。孵育結束后,取出PVDF膜,TBST洗膜(3次/15 min,80轉)
④ 顯影:吸取適量的化學發光試劑A液和B液,等體積混合,均勻加在PVDF膜上,孵育數十秒,使用凝膠成像系統曝光并獲取圖像。經凝膠成像系統測量條帶灰度值,計算實驗蛋白的相對表達量
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。