保留時間:是樣品從進入色譜柱到流出色譜柱所需要的時間,不同的物質(zhì)在不同的色譜柱上以不同的流動相洗脫會有不同的保留時間,因此保留時間是色譜分析法比較重要的參數(shù)之一。
保留時間由物質(zhì)在色譜中的分配系數(shù)決定:
Rt = t0(1 + KVs / Vm)
式中Rt表示某物質(zhì)的保留時間,t0是色譜系統(tǒng)的死時間,即流動相進入色譜柱到流出色譜柱的時間,這個時間由色譜柱的孔隙、流動相的流速等因素決定。K為分配系數(shù),Vs,Vm表示固定相和流動相的體積。
這個公式又叫做色譜過程方程,是色譜學基本的公式之一。
那么如果液相色譜保留時間推遲了怎么辦呢?
色譜分析是依靠對比保留時間來進行定性的,保留時間變化超出識別時間范圍工作站就無法定性,而保留時間推后的原因是組份在色譜柱中滯留時間變長了,原因可能如下:
1、色譜柱更換了,更換成具有保留能力更強的柱子,比如粒度變小,柱長變長,填料更換等;
2、流動相類型、比例或者流速變慢,導致對組份的吸附能力更強,流速變慢也會導致組份在柱子時保留時間更長;
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