成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>工作原理>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

PCR工作原理及步驟

來源:廣州譽維生物科技儀器有限公司   2011年05月16日 10:45  

技術原理

DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在

 

聚合酶鏈式反應

實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。

但是,DNA聚合酶在高溫時會失活,因此,每次循環都得加入新的DNA聚合酶,不僅操作煩瑣,而且價格昂貴,制約了PCR技術的應用和發展。發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。

工作原理

類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火(復性)--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時

  

聚合酶鏈式反應

間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:DNA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,于72℃左右,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈重復循環變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

工作步驟

標準的PCR過程分為三步:

1.DNA變性(90℃-96℃):雙鏈DNA模板在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈DNA

2.退火(復性)(25℃-65℃):系統溫度降低,引物與DNA模板結合,形成局部雙鏈。

3.延伸(68℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右*的活性)的作用下,以dNTP為原料,從引物的5′端→3′ 端延伸,合成與模板互補的DNA鏈。

每一循環經過變性、退火和延伸,DNA含量既增加一倍。如圖所示:

現在有些PCR因為擴增區很短,即使Taq酶活性不是*也能在很短的時間內復制完成,因此可以改為兩步法,即退火和延伸同時在60℃-65℃間進行,以減少一次升降溫過程,提高了反應速度。

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 麻豆果冻传媒2021精品传媒一区下载| 很h的小说| 午夜色情影视免费播放| 小受H灌满好涨h流出来了| 新超碰97在线观人人澡| 成人久久中文字幕| 国产亚洲精品久久久999无毒| 国产精品67人妻无码久久| 岛国搬运工www啪欧美| 婷婷人人爽人人爽人人A片| 偷拍日本中文字幕| 欧美成人一区二区三区在线视频| 天堂亚洲一区二区| 娇妻玩4P被3个男子伺候电影| 羞羞久久久久久| 成人黄色大香蕉| 国产性夜夜春夜夜爽免费下载| gogo亚洲肉体艺术照片9090| 91在线视频免费播放| 久久久国产精品久久| 精品免费国产一区二区三区四区| 插我一区二区在线观看| 免费黄色视屏网站| 日韩欧美一区二区中文字幕| 少妇肉欲小说200篇| 中文字幕一区在线观看视频| 伊人春色网站免费| 日本av在线观看| 国产真实乱对白精彩久久老熟妇女| 免费无码又爽又刺激A片软件男男| 国产成人精品综合在线| 国产精品人妻一区二区99| 中文字幕人妻丝乱一区三区| 把腿张开老子臊烂你小说描写| 亚洲av日韩精品久久久久| 日韩欧美中文字幕在线二视频| 日本无码MV免费视频在线| 中文字幕少妇熟女久久| 国产精品18久久久久久欧美| 国产精品福利一区二区| 日韩黄色免费观看|