對于懸浮細胞,該如何裂解?

我初次用Dual-Luciferase Reporter Assay法檢測Luciferase活性，在制備細胞裂解液時，由于我培養的是Raji懸浮細胞，無法按照Protocol上所說的關于貼壁細胞的方法（PBS漂洗后棄漂洗液和殘留培養基，再加入1X PLB，覆蓋單層細胞），該如何正確操作，以使懸浮細胞正常裂解以利于檢測？（特別是：對1X PLB加入的量、裂解的時間等有何講究？）謝謝！

對懸浮細胞來講，離心后PBS洗一遍，然后加裂解液。裂解的方法，一個是渦旋器震蕩2分鐘，在有就是超聲破碎，兩者可以結合使用

好。我做過相關的實驗。其實驗步驟如下：1。收集轉然后的細胞，1000r,5min.2.用無血清培養基或者PBS洗一遍。1000r,5min；3.加入1×PLB，在室溫放置15分鐘，然后迅速凍融，12000r,5min；4.熒光素酶雙報告系統檢測
這是我們實驗室多次實驗后總結的方法，很好用的！我們實驗室現在都這么做！