細胞名稱

SK-BR-3 人乳腺癌細胞

貨號

H099

種屬

人

細胞來源

ATCC/中科院/協和醫院等地引進

生長特性

貼壁  上皮細胞樣

培養條件

培養基：DMEM90%+ FBS 10%（推薦HAKATA優等胎牛血清，貨號:HN-FBS-50）

溫度：37℃     氣相：95%空氣,5% CO2

傳代

1. 用75%酒精噴灑整個培養瓶消毒，將其平躺置于培養箱中進行1-3小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將舊培養基更換成5-6mL新鮮培養基(以T25培養瓶為例)并置于細胞培養箱中培養，根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液或傳代，每2至3天加入新鮮培養基（根據細胞密度）;

2. 通過添加新鮮培養基來維持培養?；蛘呖梢酝ㄟ^離心去除舊培養基，再加入新培養基并以5-10×105個活細胞/mL的密度再懸浮進行培養。建議將細胞密度維持在5×105個至1×106個細胞/mL之間。

保存

凍存條件：70%*培養基+20%FBS+10%DMSO

(備注：建議使用本公司的冷凍液（H-W-100），用4度保存的冷凍液直接重懸細胞，不能預熱后使用。)

保存條件：液氮存儲

供應限制

僅供研究之用

常見問題及解決方案

1.培養瓶有破裂，培養液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2.收到細胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養基，如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基，請在原瓶培養基中額外添加 10%的血清（原瓶培養基的繼續使用時間長不宜超過 72 小時）

3.細胞漂?。号囵B瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。1-2小時后觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留8-10ml培養液培養觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。