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千古之謎——液相色譜柱是否能夠反沖?

來源:天津譜祥偉業(yè)科技有限公司   2019年07月05日 08:58  

這是一個(gè)困擾很多液相使用者的問題。

很多人說,如果色譜柱柱頭堵了,壓力升高了,反沖完了效果很好

也有很多人,包括廠商的工程師說不建議反沖,沖了會(huì)影響柱效。

各種說法眾說紛紜,讓這個(gè)問題幾乎成了一個(gè)業(yè)界之謎。

那么,今天我們就來分析討論一下,色譜柱到底能不能反沖,以及背后的原因是什么?

我們都知道,絕大多數(shù)液相色譜柱里面充滿了直徑幾個(gè)微米的硅膠小球,這些硅膠小球在高壓條件下被填入了色譜柱以后,色譜柱的兩端需要用篩板封起來,這樣既能夠讓流動(dòng)相順利通過,又保證硅膠小球老老實(shí)實(shí)呆在色譜柱里面,不會(huì)跟著流動(dòng)相跑出來。

當(dāng)然篩板的孔徑要足夠小,不然就封不住硅膠小球。

但是入口篩板孔徑如果做得特別小,也會(huì)產(chǎn)生一個(gè)問題,那就是很容易被樣品堵塞。樣品稍微有一點(diǎn)沒處理好,或者沒有溶解好,篩板就被堵了,柱壓就升高了,甚至柱子就廢掉了。

所以,很多廠商就決定把色譜柱入口的篩板孔徑做得比出口篩板的孔徑大一些,這樣既能保證硅膠小球不會(huì)被沖出色譜柱,也能讓柱頭不那么容易堵塞。

但是,這種情況下,色譜柱往往就不能反沖了

因?yàn)槿绻礇_,在把堵塞在入口篩板上的污染物沖出來的同時(shí),柱頭的填料可能也會(huì)被沖出來,造成柱效的降低,甚至色譜柱的報(bào)廢。

說到這里,我們總結(jié)一下:

  • 如果色譜柱出入口篩板孔徑一致的話,那就可以反沖,正反使用都無所謂,即使是色譜柱上面標(biāo)注了方向(還需注意色譜柱的填料基質(zhì))。

  • 但是如果色譜柱出入口篩板孔徑不一致的話(一般是入口孔徑大于出口孔徑),反沖就有可能造成填料漏出,柱效降低等等。

那么哪些色譜柱的出入口篩板孔徑是一致的,哪些是不一致的呢?色譜柱說明書上面有寫嗎?

不好意思,答案比較讓人失望。絕大多數(shù)色譜柱的說明書上幾乎都沒有標(biāo)明。

根據(jù)個(gè)人的了解以及跟業(yè)內(nèi)人士的交流,只能給大家如下的建議:

  • 粒徑小于3.5um的小粒徑的色譜柱不要反沖。因?yàn)樵绞切×街鋈肟诤Y板的孔徑越不一致。

  • 類似Poroshell的核殼柱不要反沖。

  • 絕大多數(shù)5um的色譜柱都可以反沖(還需注意色譜柱的填料基質(zhì))。

 

 

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