BI胎牛血清的詳細制備過程  BI授權經銷商

Biological Industries（BI）成立于1981年，是的以色列生物科技公司，其產品與服務在以色列的生命科學研究與生物技術市場中占有主導地位，并銷往35個國家。BI主要包括：胎牛血清、特殊加工工藝血清、干細胞血清、干細胞無血清培養基、細胞培養輔助試劑、人類核型分析培養基、支原體預防檢測及處理試劑、分子生物學等相關產品。

一、目的:

為了保障BI胎牛血清產品質量的均一性和穩定性，制定以下操作方法，以規范胎牛血清生產制備。

二、操作方法：

（一）采血

1、挑選出大約8月齡以上的健康妊娠母牛，經剖腹獲取小牛。

2、將小牛清洗干凈后，側放在萬級潔凈房間內的采血臺上，固定四肢及頭部。

3、用來蘇水清洗心臟外部，刮去心臟外部牛毛，露出心臟外部一側皮膚，用2%碘酒擦拭消毒。

4、在心臟部位切開一道10厘米左右的切口，取出近心血管，先用2%碘酒消毒，再用75%的酒精消毒，用止血鉗夾住血管，切開1厘米左右的切口進行插管，插好管后打開血管的止血鉗，讓牛血順采血管流入另一個潔凈房間內的采血瓶中。

5、采血瓶采血前經干烤滅菌（180℃ 2小時）后，按無菌操作注入10毫升左右經高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口，于采血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采血前先晃動瓶內生理鹽水，使其充分濕潤瓶壁后倒出，再進行采血并加塞封口。將采血后的采血瓶放37℃ 恒溫室2小時，再放入4℃冷庫 4小時以備離心。

（二）離心

將準備好的采血瓶放入離心套筒調好平衡后，對稱放入離心機，按1800轉/分鐘 離心50分鐘后，放入4℃冷庫備用。

（三）抽血清

取出4℃冷庫離心好的采血瓶，注意輕抬輕放，以免將下層血kuai和血清混層。將經過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接好空氣濾器，再接到壓縮機抽氣口上。打開壓縮機，用抽血清孔的管子輕輕抽取采血瓶內的上清液，注意控制好抽管，避免抽到下層血kuai。將抽好的血清分裝，即為粗制胎牛血清，放入-20℃冷庫冷藏備用。

• 血清過濾

1、將-20℃冷庫內的粗制血清取出化凍。

2、將化凍后的粗制血清用經過高壓滅菌的12層醫用脫脂棉紗布進行初濾。

3、把初濾后的血清倒入大罐進行混合。

4、將裝好濾芯的濾器做密封性試驗和發泡試驗合格后，經過高壓滅菌，在潔凈室內用無菌操作法將濾器按濾柱孔徑由大到小的順序進行組裝，并裝上壓力表。把濾器大孔徑一端和蠕動泵出口進行連接。

5、用蠕動泵將大罐內的血清送入濾器進行過濾。

6、將濾出的血清在百級凈化操作臺上進行分裝后，即為精制胎牛血清，送-20℃冷庫儲存。

三、注意事項：

1、在操作過程中，要經常用75%的酒精對手部進行消毒，同時避免接觸牛血或血清，特別是有傷口的部位，以免感染。

2、在采血插管過程中，插管避免接觸到未消毒的部位，盡量深入血管，使牛血能快速流完為好，并固定好插管，避免脫離動脈血管。

3、在抽血清的過程中，控制好壓縮機的壓力大小，避免壓力過大，抽到下層的沉淀物。

4、在過濾過程中，控制好壓力的大小，避免超過濾柱工作壓力。

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