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人20-HETE ELISA試劑盒實驗原理及注意事項

來源:上海臻科生物科技有限公司   2019年05月15日 17:19  

人20-HETEELISA試劑盒實驗原理及注意事項

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包人20-HETE()捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人20-HETE()呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 

注意事項

  • 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
  • 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
  • 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
  • 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
  • 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
  • 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
  • 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
  • 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
  • 不能使用過期產品。
  • 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置

 

 

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