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ITC等溫滴定量熱儀的主要用途

來源:TA儀器   2019年03月18日 09:30  
  等溫滴定量熱法(Isothermal Titration Calorimetry, ITC)是近年來發展起來的一種研究生物熱力學與生物動力學的重要方法,它通過高靈敏度、高自動化的微量量熱儀連續、準確地監測和記錄一個變化過程的量熱曲線,原位、在線和無損傷地同時提供熱力學和動力學信息。
  微量熱法具有許多*之處。它對被研究體系的溶劑性質、光譜性質和電學性質等沒有任何限制條件,即具有非特異性的*優勢,樣品用量小,方法靈敏度和度高(本儀器小可檢測熱功率2 nW,小可檢測熱效應0.125uJ,生物樣品小用量0.4ug,溫度范圍2 ℃ - 80 ℃,滴定池體積(1.43 ml)。實驗時間較短(典型的ITC實驗只需30-60分鐘,并加上幾分鐘的響應時間),操作簡單(整個實驗由計算機控制,使用者只需輸入實驗的參數,如溫度、注射次數、注射量等,計算機就可以完成整個實驗,再由Origin軟件分析ITC得到的數據)。測量時不需要制成透明清澈的溶液, 而且量熱實驗完畢的樣品未遭破壞,還可以進行后續生化分析。盡管微量熱法缺乏特異性但由于生物體系本身具有特異性,因此這種非特異性方法有時可以得到用特異方法得不到的結果,這有助于發現新現象和新規律,特別適應于研究生物體系中的各種特異過程。
  獲得生物分子相互作用的完整熱力學參數,包括結合常數、結合位點數、摩爾結合焓、摩爾結合熵、摩爾恒壓熱容,和動力學參數(如酶活力、酶促反應米氏常數和酶轉換數)。

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