利巴韋林屬于抗病毒藥物,在獸禽中長期大量使用容易誘導流感病毒變異,已被美國FDA和我國農業部列入獸藥禁止使用范疇。
目前市場上檢測利巴韋林主要參考標準《SN/T 4519-2016出口動物源食品中利巴韋林殘留量的測定液相色譜-質譜/質譜法》,其方法是:用乙腈和三氯乙酸溶液提取,酶解后用PBA小柱凈化,內標法定量,整個過程操作繁瑣,需要配置大量不同pH值的溶液,回收率不穩定。聚光科技(杭州)股份有限公司下屬子公司上海安譜實驗科技股份有限公司(以下簡稱“安譜實驗”)利用自主研發的獸殘QuEChERS的產品(SBEQ-CA8802-B和SBEQ-CA8803-25)作為凈化手段,采用基質標曲外標法定量,用于雞肉中利巴韋林的檢測,操作簡單便捷,耗時短,回收率高且穩定,可作為廣大檢測工作者檢測該項目的參考方法。
前處理方法
準確稱取2g(至0.01g)均質好的雞肉(肉糊狀) 至50 mL離心管中,加入15mL乙腈溶液,加入標品(上機濃度10ppb),再加入緩沖鹽包 SBEQ-CA8802-B,旋渦混合2min,超聲波提取10min,5000~10000r/min離心5min,吸取上清液至 SBEQ-CA8803-25 CNW dSPE定制獸藥凈化管。重復提取兩次,合并兩次提取液。旋渦混合5min,5000~10000r/min 離心5min。取出凈化管中所有上清液,40 ºC減壓蒸發至近干。加入1mL乙腈-水溶液(1:1)溶解,渦旋混合1min,過0.22µm濾膜,供液相色譜-質譜/質譜儀測定。
色譜條件
液相條件:
色譜柱: Athena UHPLC C18(2.1*50mm,1.8µm);
流動相: 0.1% 甲酸水溶液 - 甲醇 =95:5;
流速: 200µL/min;
柱溫: 30 ºC;
進樣量: 5µL;
質譜參數 :
Ionization Mode: ESI+
Capillary Voltage: 4000V
Gas Temp: 350ºC
Gas flow: 8 L/min
Nebulizer: 35 ps
實驗譜圖

10ppb單標(基質配標)

基質加標 10ppb
基質類型 | 目標物 | 平均回收率(%) | RSD(%) |
雞肉 | 利巴韋林 | 105.7 | 7 |
實驗耗材
貨號 | 名稱 | 規格 | 品牌 |
SBEQ-CA8802-B | CNW dSPE定制獸藥提取包 | 50 pcs | CNW |
SBEQ-CA8803-25 | CNW dSPE定制獸藥凈化管 | 25 pcs | CNW |
CDCT-C16813570 | 病毒唑,利巴韋林標準品 | 純品型,有證書,50mg | Dr |
LAEQ-2105UA | Athena UHPLC C18 液相色譜柱 | 2.1 × 50mm,1.8um | CNW |
CAEQ-4-003306-4000 | 色譜純乙腈 | 4L | CNW |
CAEQ-4-003302-4000 | 色譜純甲醇 | 4L | CNW |
SCAA-113 | 親水性PTFE針式濾器 | 13mm*0.45um,粉色,100只/罐 | ANPEL |
SCAA-114 | 親水性PTFE針式濾器 | 13mm*0.22um,金色,100只/罐 | ANPEL |
ADEQ-2600111 | 3mL 塑料巴斯德吸管、160mm | 500/箱 | CNW |
VAAP-32009E-1232A-100 | CNW 9mm棕色螺紋口自動進樣瓶 | 100只/塑盒,50塑盒/紙箱 | CNW |
VAAP-32009E-1232-100 | CNW 9mm透明螺紋口自動進樣瓶 | 100只/塑盒,50塑盒/紙箱 | CNW |
VEAP-5394-09FRB-100 | 兼容Agilent的9mm藍色開孔擰蓋、含PTFE/橡膠隔墊,Bond | 100/袋 | CNW |
EFAA-DC12H | 氮吹儀 | ANPEL | |
EDAA-2101TH | 超聲清洗器,100W(帶加熱功能) |
儀器外形尺寸mm:320*174*280; 內槽尺寸mm:300*150*100;4L.
| ANPEL |
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