多年來,酵母菌在生物化學、遺傳和分子分析等方面取得了大量的研究成果,已成為生物制藥研究者的模型生物系統和工具。因此,酵母已成為基因表達研究和重組蛋白的常用載體。盡管研究中使用的酵母種類很多,包括Pichia、Hansen和Debali酵母,但酵母是常用的。
傳統的酶法很難從細胞中提取完整的酵母RNA和細胞內蛋白。溶菌酶通常是粗制濫造的,含有RNA酶和蛋白酶,不僅破壞細胞壁,而且破壞靶分子。此外,原生質體的酶解通常需要添加洗滌劑,這會導致各種蛋白質的失活。因此,機械裂解或破壞酵母細胞通常需要釋放小分子。
1、粉碎前的準備:
0.1g細菌(本實驗以0.1g菌體為例);XX鋼珠;研磨機(選用品牌新銳精儀Gd-300);XX研磨罐。
2、磨削加工。
將0.1g細菌與30MLPBS溶液混合,用移液管均勻滴入液氮。收集冷凍的球。頻率調整到XXHz,振動時間為XXS。取出研磨罐,放入液氮預冷XXS,取出再研磨。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。