ELISA(酶聯免疫試驗)以其靈敏度較高、特異性好的特點已廣泛用于科研實驗及臨床,越來越多科研單位選擇用ELISA實驗方法完成研究課題。的試劑、好的儀器和正確的操作是保證ELISA試劑盒檢測結果準確可靠的必要條件,但樣本的收集及保存操作不當也會影響ELISA實驗結果。樣本的收集跟保存聽上去貌似很簡單,但不乏有許多科研工作者因為樣本的收集跟保存沒做好而影響實驗結果。
下面針對樣本收集及保存紀寧生物提幾點建議:
1.嚴重溶血,以HRP為標記的ELISA測定中,殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性;
2.混有紅細胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內不易洗凈;如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應:
3.標本凝固不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;
4.采血試管洗滌不*、反復使用易交叉污染:塑料試管能吸附抗原物質,樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。
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