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組織硫化氫含量比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2018年08月01日 15:28  

組織硫化氫含量比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

主要用途

 

組織硫化氫含量比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過堿性苦味酸與肌酐反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物所呈現(xiàn)的吸光峰值的變化即采用比色法來測(cè)定樣品中硫化氫含量的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改亞甲基藍(lán)方法、成功實(shí)驗(yàn)證明的其適用于各種人體、動(dòng)物組織裂解樣品等硫化氫水平檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。

 

技術(shù)背景

 

硫化氫(hydrogen sulfide;H2S)是一種自然發(fā)生的,具有腐蝕性和可燃性,不穩(wěn)定的易被氧化的無色氣體,為半胱氨酸脫硫(desulfuration)代謝產(chǎn)物,是第三個(gè)生理性氣體信使分子(messenger molecule)或氣體傳導(dǎo)分子(gasotransmitter),存在于腦、心臟、肺、肝、小腸、胰腺以及海綿體(cavernosum)組織等,其中腦組織含量較低,腎組織含量較高。神經(jīng)系統(tǒng)的胱硫醚-β-合成酶(Cystathionine-β-synthase;CBS)和心血管系統(tǒng)的胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine γ-lyase;CGL)是參與內(nèi)源性硫化氫生成的主要成員。一旦機(jī)體缺氧,硫化氫含量即增高。硫化氫旨在調(diào)節(jié)組織內(nèi)含硫氨基酸的水平,具有心血管系統(tǒng)的生理功能和病理生理調(diào)節(jié)作用,例如誘導(dǎo)血管平滑肌松弛,血管擴(kuò)張(vasodilation),致血壓下降,以及促炎性作用。同時(shí)硫化氫具有毒性作用,會(huì)造成嗅覺神經(jīng)迅速癱瘓,抑制細(xì)胞色素C氧化酶,增加線粒體膜通道孔開放,引起心臟、小腸、生殖系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)平滑肌過度松弛,而產(chǎn)生器官損傷、低血壓、心動(dòng)過緩(bradycardia)等癥狀。在自然環(huán)境中,硫化氫是硫循環(huán)(sulfur cycle的主要中間產(chǎn)物,包括有機(jī)硫化物的礦物化或分解、微生物的同化作用,以及氧化還原。作為化學(xué)窒息性(asphyxiant)氣體,硫化氫對(duì)于魚類和其它水生動(dòng)物具有毒性作用,同時(shí)也是細(xì)菌污染的標(biāo)志。使用醋酸鋅(zinc acetate)在堿性條件下,捕獲硫化氫,形成穩(wěn)定的硫化鋅沉淀;在酸性條件下,溶解的硫化鋅與催化劑對(duì)氨基二胺(N,N-dimethyl-p-phenylenediamine)和氯化鐵(ferric chloride)反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色的亞甲基藍(lán)(methylene blue),通過其終點(diǎn)吸收峰值的變化670nm波長(zhǎng))定量分析硫化氫的含量。

                             

產(chǎn)品內(nèi)容

 

GENMED清理液(Reagent A) 毫升

GENMED穩(wěn)定液(Reagent B) 毫升

GENMED去干擾液(Reagent C) 毫升

GENMED反應(yīng)液(Reagent D)   毫升

GENMED顯色液(Reagent E)   毫升

GENMED標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent F)   毫升

產(chǎn)品說明書    1份

 

保存方式

 

保存GENMED反應(yīng)液(Reagent D)和GENMED標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent F)在-20冰箱里,其余的保存在4冰箱里GENMED反應(yīng)液(Reagent D)避免光照;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證6

 

用戶自備

 

1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器

15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器

DOUNCE勻漿器:用于裂解組織細(xì)胞

微型臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作

比色皿:用于比色的容器

分光光度儀:用于比色分析

 

實(shí)驗(yàn)步驟

 

  • 樣品準(zhǔn)備

 

  1. 手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定200毫克組織重量 
  2. (選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管
  3. (選擇步驟)加入xx毫升GENMED清理液(Reagent A)清洗1次
  4. 即刻用刀片切碎組織
  5. 放進(jìn)一個(gè)預(yù)冷的15毫升錐形離心管
  6. 加入預(yù)冷的xx毫GENMED清理液(Reagent A)
  7. 渦旋震蕩5秒,充分混勻
  8. 即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約40至80下)
  9. 將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管
  10. 放進(jìn)4臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g
  11. 移取500微升到新的1.5毫升離心管
  12. 加入xx微升GENMED穩(wěn)定液(Reagent B),混勻
  13. 放在冰槽里待測(cè)(注意:須1周內(nèi)使用)

 

  • 標(biāo)準(zhǔn)樣品準(zhǔn)備
    1. 移取xx微升GENMED標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent F)到新的1.5毫升離心管
    2. 加入xx微升GENMED穩(wěn)定液(Reagent B),混勻
    3. 放在冰槽里待測(cè)

 

  • 測(cè)定準(zhǔn)備

 

  1. 準(zhǔn)備好待測(cè)樣品,置于冰槽里
  2. 設(shè)定好分光光度儀:波長(zhǎng)670nm并置零

 

  • 樣品測(cè)定

 

  1. 移取xx微升GENMED去干擾液(Reagent C上述待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)樣品管里,混勻
  2. 加入xx微升GENMED反應(yīng)液(Reagent D
  3. 加入xx微升GENMED顯色液(Reagent E),混勻
  4. 室溫下孵育20分鐘
  5. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心3分鐘,速度為5000g
  6. 移取1毫升上清液到比色皿
  7. 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),獲得待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品讀數(shù)

 

四、計(jì)算樣品濃度

 

 

 

轉(zhuǎn)化為組織實(shí)際硫化氫含量

 

 

注意事項(xiàng)

 

  1. 本產(chǎn)品為20次操作,包括標(biāo)準(zhǔn)樣品
  2. 本產(chǎn)品檢測(cè)范圍在0.1毫克/升(10微摩爾/升)至8.5毫克/升(250微摩爾/升)
  3. 操作時(shí),須戴手套
  4. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
  5. 系統(tǒng)操作過程中,標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)定只需1
  6. 試劑出現(xiàn)沉淀可以離心去除后檢測(cè)
  7. 測(cè)定值由變化
  8. 用戶可以使用664nm至670nm波長(zhǎng)范圍的任一波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)
  9. 比色測(cè)定后,比色皿須清洗*
  10. 如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品
  11. 樣品中碘(iodine)大于2毫克/升硫代硫酸鹽(thiosulfate)或亞硫酸鹽(sulfite)大于10毫克/升、氰亞鐵酸鹽可能干擾檢測(cè)
  12. 硫化氫濃度換算:1毫克/升=29.4微摩爾/升
  13. 本公司提供系列生化學(xué)檢測(cè)試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

 

  1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
  2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感

 

使用承諾

 

杰美基因秉著信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量承諾的宗旨為我們的用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后,應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定,保證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題,請(qǐng)立即以書面形式(實(shí)驗(yàn)報(bào)告)與本公司,并將該產(chǎn)品退回,經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致,本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致,本公司不承擔(dān)由此造成的損失。

 

友情提醒

 

IF IT DOESN’T WORK RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

訂購(gòu)信息

 

單組分訂購(gòu)信息

 

編號(hào) 名稱 規(guī)格

GMS70105.1 GENMED組織硫化氫含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 20

GMS70105.1A GENMED清理液Reagent A 毫升

GMS70105.1B GENMED穩(wěn)定液Reagent B 毫升

GMS70105.1C GENMED去干擾液(Reagent C     毫升

GMS70105.1D  GENMED反應(yīng)液(Reagent D      毫升

GMS70105.1E  GENMED顯色液(Reagent E      毫升

GMS70105.1F  GENMED標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent F      毫升

 

試劑盒訂購(gòu)信息

 

產(chǎn)品編號(hào)

名稱

規(guī)格

GMS70105.1

組織硫化氫含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

20次

GMS70105.2

血液硫化氫含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

20次

GMS70105.3

細(xì)胞硫化氫含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

20次

GMS70105.4

水樣品硫化氫含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

20次

GMS70105.5

細(xì)菌硫化氫含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

20次

 

 

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