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2015版中國(guó)藥典款冬花液相色譜分析

來源:上海屹利科學(xué)儀器有限公司   2018年07月04日 11:28  

■《中國(guó)藥典》 收載情況

【來源】 本品為菊科植物款冬Tussilago farfaraL.的干燥花蕾。
【功能與主治】 潤(rùn)肺下氣,止咳化痰。用于新久咳嗽,喘咳痰多,勞嗽咳血。
【含量測(cè)定】 款冬酮照液相色譜法(通則0512)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(85:15)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm。理論板數(shù)按款冬酮峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。
對(duì)照品溶液的制備:取款冬酮對(duì)照品適量,精密稱定,加流動(dòng)相制成每1mL含50μg的溶液,即得。
供試品溶液的制備:取本品粉末(過4號(hào)篩)約1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇20mL,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率40kHZ)1小時(shí),放冷,再稱定重量,用乙醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,取續(xù)濾液,即得。
測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL,注入液相色譜儀,測(cè)定,即得。

■款冬花藥材液相色譜方法的建立

【色譜行為描述】
  《中國(guó)藥典》中款冬花的含量測(cè)定以款冬酮為質(zhì)量評(píng)價(jià)依據(jù),其在Inertsil ODS-3(4.6×250mm,5μm )中的色譜行為是:在流動(dòng)相組成為甲醇-水系統(tǒng)時(shí),峰與雜質(zhì)峰距離較近,流動(dòng)相的比例對(duì)款冬酮及相鄰峰的分離有顯著的影響,流動(dòng)相的比例為甲醇-水(75:25)時(shí)其分離效果,款冬花色譜圖中雜質(zhì)峰與款冬酮峰的分離效果較好,且款冬酮峰的保留時(shí)間比較合適;柱溫對(duì)款冬酮的保留時(shí)間及與相鄰色譜峰的分離度有微小影響。推薦流動(dòng)相配比范圍:甲醇:水=(75-76):(25-24),柱溫范圍:25-40℃。經(jīng)過考察,在流動(dòng)相甲醇-水比例為75:25,柱溫40℃的色譜條件下能得到較滿意的分析效果。
  在上述色譜條件下,采用Shim-pack VP-ODS(4.6×250mm,5μm )色譜柱,柱效和采用Inertsil ODS-3(4.6×250mm,5μm )色譜柱相當(dāng),保留時(shí)間比采用Inertsil ODS-3(4.6×250mm,5μm )色譜柱短大約7min,亦可得到良好的分析效果。
樣品來源: 本品為菊科植物款冬Tussilago farfaraL.的干燥花蕾。
對(duì)照品: 款冬酮(中國(guó)科學(xué)院成都生物研究所,批號(hào):MUST-15092401,含量:98.92%)
對(duì)照品溶液的制備: 取款冬酮對(duì)照品適量,精密稱定,加流動(dòng)相制成每1mL含50μg的溶液,即得。
供試品溶液的制備: 取本品粉末(過4號(hào)篩)約1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇20mL,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率40kHZ)1小時(shí),放冷,再稱定重量,用乙醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,取續(xù)濾液,即得。

推薦使用色譜條件: 儀器配置:
色譜柱:5020-01732 Inertsil ODS-3 (4.6×250mm,5μm ) LC-20AD 高壓泵
流動(dòng)相:甲醇-水(75:25) SPD-10AVP紫外可見光檢測(cè)器
柱溫:40℃ DGU-20A3脫氣機(jī)
檢測(cè)波長(zhǎng):220nm CTO-20AS柱溫箱
流速:1.0mL/min SIL-10ADvp自動(dòng)進(jìn)樣器
進(jìn)樣量:10μL  
*此條件同樣適用于Shim-pack VP-ODS(4.6×250mm, 5μm)色譜柱,相關(guān)譜圖見附注1。

■款冬酮對(duì)照品溶液:

■供試品溶液:

■款冬酮標(biāo)準(zhǔn)曲線:

■款冬酮的重復(fù)性:

序號(hào)對(duì)照品(10μL)樣品(10μL)
t/min峰面積t/min峰面積
127.797129405827.6681517747
227.766128909227.6291517225
327.782129124627.6681519401
平均值27.782129146527.6551518124
RSD/%0.050.190.080.07

附注1:Shim-pack VP-ODS (4.6×250mm,5μm )色譜柱用于款冬花分析 

■款冬酮對(duì)照品溶液:

■供試品溶液:

* 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部陳世忠教授課題組提供

 

 

 

 

 

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