ELISA試劑盒顯色這一步驟可能碰到的問題有：
A、顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑。
B、加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。
相應(yīng)解決辦法：
1、加樣時(shí)保持顯色劑不外流。
2、顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
3、A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
注：顯色是elisa實(shí)驗(yàn)的zui后一步溫育反應(yīng)，所以顯色也是重要步驟之一。

采購(gòu)ELISA試劑盒時(shí)各決定因素如下：
A、抗體類型：?jiǎn)慰寺】贵w和多克隆抗體都能夠用于ELISA試劑盒，實(shí)際上有時(shí)候二者結(jié)合效果更好。
B、交叉反應(yīng)：在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)用的二抗必須特異性針對(duì)檢測(cè)一抗，而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。
C、檢測(cè)方式：一般ELISA試劑盒檢測(cè)的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶，而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物，酶可以結(jié)合在一抗上，也可以結(jié)合在二抗上，還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。
D、實(shí)驗(yàn)類型：ELISA試劑盒有多種類型，不過它們都有一個(gè)共同特點(diǎn)，就是進(jìn)行抗原捕獲，一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。
 

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