植物可溶性糖含量試劑盒說明(微量法)

貨號：MB0035

規(guī)格: 100 管/96 樣

產(chǎn)品簡介：

糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)。總糖是指樣品中的還原

單糖及在本法測定條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。

檢測原理為蒽酮比色法。可用于可溶性單糖、寡糖和多糖的含量測定，具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微

量樣品的測定等優(yōu)點。

試驗中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計/酶標儀、沸水浴、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、濃硫酸、研缽和蒸餾水。

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：粉劑×1 瓶，4℃避光保存；

試劑二：10ml×1 瓶，4℃保存；

操作步驟：

一、樣品中可溶性糖的提取：

稱取約0.1～0.2g 樣本，加入1ml 蒸餾水研磨成勻漿，倒入有蓋離心管中，沸水浴10 min（蓋緊，以防止水

分散失），冷卻后，8000g，常溫離心10min，取上清液于10ml 試管中，用蒸餾水定容至10ml，搖勻備用。

二、測定步驟：

1. 分光光度計或酶標儀預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長至620nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 調(diào)節(jié)水浴鍋至95℃。

3. 工作液的配制：在試劑一中加入2.5 ml 試劑二。充分溶解后使用，如難溶解，可加熱攪拌(用不完的試劑可4℃

保存一周)。

4. 加樣表（在EP 管中反應(yīng))：

混勻，置95℃水浴中10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻至室溫后，取200μl 轉(zhuǎn)移至微量石英比色皿或96

孔板中，于620nm 處，分別讀取空白管和測定管吸光值，ΔA=A 測定管-A 空白管。

注意：

1. 空白管只要做一管。

2. 如果ΔA 大于1，需要將樣本用蒸餾水稀釋，計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

3. 由于濃硫酸具有強腐蝕性，請謹慎操作。

可溶性糖含量計算：

A． 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、 標準條件下測定的回歸方程為y =8.55x - 0.07；x 為標準品濃度（mg/ ml），y 為吸光值。

2、 按樣本鮮重計算

可溶性糖（mg /g 鮮重）=〔(ΔA＋0.07 ) ÷8.55×V1〕÷（W×V1÷V2）＝1.17 ×(ΔA＋0.07 ) ÷W

3、 按樣本蛋白濃度計算：

可溶性糖（mg / mg prot）= 〔(ΔA＋0.07 ) ÷8.55×V1〕÷（V1×Cpr）＝0.117 ×(ΔA＋0.07 ) ÷Cpr

V1：加入樣本體積，0.04ml；V2：加入提取液體積，10ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g。

B． 用96 孔板測定的計算公式如下

1、 標準條件下測定的回歸方程為y =4.275x - 0.07；x 為標準品濃度（mg/ ml），y 為吸光值。

2、 按樣本鮮重計算

可溶性糖（mg /g 鮮重）=〔(ΔA＋0.07 ) ÷4.275×V1〕÷（W×V1÷V2）＝2.34 ×(ΔA＋0.07 ) ÷W

3、 按樣本蛋白濃度計算：

可溶性糖（mg / mg prot）=〔(ΔA＋0.07 ) ÷4.275×V1〕÷（V1×Cpr）＝0.234 ×(ΔA＋0.07 ) ÷Cpr

V1：加入樣本體積，0.04ml；V2：加入提取液體積，10ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g。