今天我們來談一下怎樣活絡使用ELISA這個檢測方法以及怎樣去選擇ELISA試劑盒。ELISA這個方法的原理,我們都很理解,網上的資料許多。可實在用起來的時分,ELISA試劑盒偶然間就會有點犯模糊,我談一下自己的了解。
1、抵御胰島素的檢測,我仍是引薦millpore 旗下LInco公司的檢測試劑盒,不管是放免仍是ELISA,傳聞權在他們手中。 zui近看了資料,瑞典Mercodia公司的胰島素檢測試劑盒也是得到商場的招認的。抵御ox-ldl的檢測,Mercodia公司也是很牛的。
2、抵御一些小分子的檢測,例如:前哨腺素、糖皮質激素的檢測,我的了解是要用競爭法ELISA去檢測,也要購買選用這個方法的試劑盒。一般細胞因子的檢測,都是選用常規的夾心法ELISA檢測,因為因子分子量比力大,一般10幾個KD左右,很簡略找到兩個或多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不通的表位,也就抉擇了包被抗體和檢測抗體無法一同結合小分子并固相化。解決方案就是酶標板上包被二抗,每個孔參加一定量的酶標的小分子,然后加樣品,再加不帶標志的檢測抗體,顯色底物。樣品的政策小分子的含量越高,吸光度越低。
3、有些客戶會用OVA(卵清卵白)做一些哮喘,ELISA試劑盒過敏性腸炎的模型,然后會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清內里IgG,IgE等方針。當客戶向我咨詢置辦這幾個方針的試劑盒的時分,我很肯定地說這些方針的檢測要你自己特制,不會有商品化的試劑盒出售的。當你baidu一下時,頁面出來許多的商品化的試劑盒,千人一面的明書時分,我真的是蒙了,我置疑自己跟不上時代了。我不去議論這些試劑盒的真假,我依舊主張做這些檢測方針的朋友,選擇sigma公司V等級的OVA,然后用這個來造模,自己包板摸條件,用OD值來比較抗體含量的改變。
4、NO的檢測,一般都是選用經典的Greiss法,現在商場上竟然有NO ELISA試劑盒,真是徹夜未眠也搞不理解。其他還有做氧化應激方針MDA的檢測,我仍是引薦各位用碧云天或許進口的檢測試劑盒,而不是ELISA試劑盒。
5、ELISA檢測方法簡略,活絡度高,ELISA試劑盒我個人認為ELISA檢測血清或許培養上清的細胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測;病原體抗原的定性與定量;評估自己制備的血清抗體的效價等。許多客戶有個誤區,拿來一個方針就想當然地嘗試用ELISA去檢測,我仍是主張多動腦,該檢測活性的檢測活性,該做western的做western。
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