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Western抗體洗脫液中文版說明書

來源:銘修(上海)生物科技有限公司   2017年12月28日 12:21  

Western抗體洗脫液中文版說明書

產(chǎn)品簡介:

Western抗體洗脫液(Stripping buffer)又稱膜再生液或Western一抗二抗去除液,用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。在Western中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測后,有時還需要檢測GAPDH、β-actin等表達(dá)量相對穩(wěn)定的管家蛋白或其它蛋白作為參照。Stripping buffer可以洗脫一抗二抗,非常方便地重新利用使用過的膜,檢測其它蛋白。 Stripping buffer多次重復(fù)使用同一張膜,會導(dǎo)致蛋白信號的減弱不宜重復(fù)利用膜,一般可以利用2~3次。

MBWestern Stripping buffer 主要依靠堿性來解除一抗二抗的結(jié)合,同時又不會導(dǎo)致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白的損失, 適用于Western化學(xué)發(fā)光檢測后的蛋白膜的重復(fù)利用,尤其適用于PVDF膜,其次為硝酸纖維素膜。非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(如DAB,NBT/BCIP)不適用于本試劑。

產(chǎn)品組成:

                        編號

名稱

PW0053

PW0053

Storage

Western Stripping buffer(堿性)

100ml

500ml

RT

使用說明書

1份

 

自備材料:

1、 蒸餾水

2、 搖床

3、 (可選)濾紙

4、 Western封閉液

操作步驟(僅供參考)

1、在膜完成Western化學(xué)發(fā)光檢測后,蒸餾水中漂洗5min。

2、棄蒸餾水,加入Western Stripping buffer,*覆蓋住膜。

3、搖床上漂洗5min。

4、棄液,盡量把Western Stripping buffer去除干凈,必要情況下,可以用濾紙吸干。

5、加入蒸餾水振蕩漂洗2~3次,每次漂洗3~5min。

6、入封閉液進(jìn)行封閉后(推薦酪氨酸或脫脂奶粉作為封閉液),進(jìn)行Western后續(xù)操作。

注意事項(xiàng):

使用辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體時,封閉液必須使用5%脫脂奶粉配制。使用堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗體時,封閉液必須使用酪蛋白(casein)配制。

Western Stripping buffer(堿性)特別適用于PVDF膜的再生,硝酸纖維素膜的再生效果不如PVDF膜。

Western Stripping buffer(堿性)適用于ECL等類似的化學(xué)發(fā)光液的檢測后的一抗二抗洗脫。非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(如DAB,NBT/BCIP)不適用于本試劑。

Western Stripping buffer(堿性)有輕微腐蝕性,使用時請注意防護(hù)。

為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期: 12個月有效。

 

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