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正反相分析樣品基本制備方法

來源:東曹(上海)生物科技有限公司   2017年12月19日 09:34  
正相、反相分析用的樣品基本都可按照以下方法配制:
 
基本原則:
 
1、樣品先在流動(dòng)相中溶解,經(jīng)過0.4~0.5μ的過濾器過濾后,注入10~50μL。樣品在流動(dòng)相中溶解后,Vo附近受到溶劑峰影響非常小,所以對(duì)分析在Vo附近洗脫的樣品非常有利。(當(dāng)色譜柱的尺寸是4.6mmI.D. x 150 ~250 mm L)
2、請(qǐng)避免過載
過載的判斷方法 注入容量一定,把樣品濃度稀釋10~100倍來分析,或者樣品濃度一定,把注入量減少到5分之一來分析的時(shí)候,如果峰型比以前的實(shí)驗(yàn)有所改善,有可能就是樣品濃度或者注入容量的過載。
3、標(biāo)準(zhǔn)樣品的注入量應(yīng)該和實(shí)際樣品的注入量相等。如果不相等的話可能會(huì)造成洗脫時(shí)間的差異。但是,標(biāo)準(zhǔn)樣品的檢定圖譜沒有問題也不能保證實(shí)際樣品分析過程中不產(chǎn)生問題。雖然過載可能是產(chǎn)生問題的原因,但是主要還是因?yàn)榘褬悠啡芙庠诓徽_的流動(dòng)相中。 
 
故障:
 
(a) 形成前延峰或拖尾峰
(b) 洗脫時(shí)間改變
(c) 形成裂峰
(d) 形成寬峰
(如果寬峰太寬以致無法識(shí)別,可能會(huì)被誤認(rèn)為是基線混亂)
(e) 色譜柱壓力上升
(f) 上述的故障只有特定的樣品會(huì)產(chǎn)生

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