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關于色譜柱的安裝

來源:東曹(上海)生物科技有限公司   2017年09月22日 09:13  
色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。下面介紹色譜柱安裝時需要注意的事項。
 
色譜柱的安裝:
 
1) 將液相色譜裝置中的流動相*置換后再連接色譜柱,并*排出流路內的空氣。
裝置內的液體和所使用的流動相不能相溶的情況下,使用雙方都能相溶的液體做過渡。比如從水置換到氯仿的情況,就需要使用丙酮做過渡,才能*置換。
將鹽溶液置換成有機溶劑的時候,需要通過純水、丙酮的順序來進行置換。相反,從有機溶劑轉換成鹽溶液的情況下,需要通過丙酮、純水的順序置換。
不僅僅是泵,流動相流動的所有流路都必須進行置換。例如,注入樣品的情況,軟管內的液體也需要置換。另外,如果使用壓力計等別的軟管的情況,取下來的管子也必須由流動相洗凈后才能繼續使用。
 
2) 色譜柱保存方法不對或者長期不使用的情況下,色譜柱的出入口可能會有空氣殘留。這種情況下,必須先把空氣*排出后才連接到裝置中。
避免快速加熱,加熱溫度不要超過色譜柱的zui高負荷溫度。
把柱子入口側的螺栓打開,然后加溫(一般加溫到手心感到溫暖的程度就足夠了),等液體滿出來以后接到裝置上。然后,打開出口處的螺栓,用泵送液,等確認出口處有液體流出后,連接到裝置中。這樣操作,就算后面再連接一根色譜柱也能*除去空氣。
 
3) 在泵運作的時候連接色譜柱。確保能讓流動相按照色譜柱上箭頭的方向流動的狀態連接色譜柱。
 
4) 色譜柱加溫使用的時候,先用0.2~0.3mL/min的低流量一邊送液一邊升溫。達到所定溫度后,再漸漸的增加流量至測定流量。
 
5) 色譜柱需要安定時間。連接到裝置中立即進行測試的情況下,*次很難得到好的分析結果。

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