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采用密度梯度離心法分離臍血干細胞

來源:長沙湘智離心機儀器有限公司   2017年08月10日 08:37  

    利用 3 種質量濃度的聚蔗糖泛影葡胺分離液分離臍血單個核細胞,用細胞計數法、活細胞染色法及流式細胞計數儀分析單個核細胞的表面標志,以探討密度梯度離心法分離人臍血干細胞分離介質的*濃度,建立臨床級干細胞分離應用方案,使用的離心機設備為冷凍離心機

    臍血由于其來源容易,所含細胞種類和數量比較多,比骨髓和外周血中的細胞更為原始,且其臨床應用不涉及社會、倫理、法律方面的限制等優勢。臍血間充質干細胞可以分化為成骨、軟骨、脂肪細胞等,內皮干/祖細胞治療缺血性疾病,已經在臨床有突出的療效。

國內、外分離臍血干細胞方法常采用磁珠/流式細胞分選法、臍血庫儀器/羥乙基淀粉沉淀法和密度梯度離心法。由于目的不同,各類方法有其自身特點

    臍血庫分離干細胞常用羥乙基淀粉沉淀和儀器離心分離法,分離的細胞量大、成分較多但混有大量紅細胞,適合用作大量分離、儲存干細胞。密度梯度離心法多采用Percoll、Ficoll分離液分離細胞,得到單個核細胞群,該細胞群成分復雜,純度不高。但密度梯度離心法分離臍血單個核細胞由于細胞得率高、方法簡單等突出優點,有望成為制備臨床級干細胞的優選方法,分離介質以聚蔗糖泛影葡胺zui為常用。

    應用臍血離心分離干細胞的目的是獲得以干細胞(間充質干細胞、造血干細胞)為主要群體的單個核細胞群。用聚蔗糖泛影葡胺為分離介質研究何種密度狀態下獲得的干細胞zui多,目前尚未深入研究。文章在前期工作基礎上,探索密度梯度離心法用3種不同質量濃度分離液分離臍血單個核細胞,比較分離單個核細胞不同亞群的比例和純度,試圖找出用密度梯度離心法獲得干細胞比例和純度較高的分離介質。

 

 

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