每一盒ELISA試劑盒里邊都有一份對應的闡明書，而每一份闡明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋份額，為何樣本都需求稀釋呢?今天的文章中，上海研域將為您剖析：為何ELISA試驗血清樣本都需求稀釋?

在ELISA試劑盒試驗血清為何要稀釋？有兩個原因：
1，競賽按捺對比顯著，應稀釋競賽物；
2，以下降非特異性反響，使特異性的抗原抗體反響充分體現出來。
血清稀釋用通常的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當然假如你嫌費事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不論你是用直接競賽還是直接競賽，血清的稀釋倍數必定要事前確定，但也不必一點點，你做一個預試驗即可，挑選OD在1.0左右的稀釋倍數，即你的ELISA中陰性孔OD在1.0，這么作出來的曲線對比靈敏。

ELISA試劑盒試驗稀釋血清的步驟：

先把蛋白稀釋必定的倍數，比如說10倍、20倍稀釋（這么能夠大體確定一個參數），將抗原進行一系列稀釋包被微量反響板，再用必定稀釋度的陽性參閱血清和陰性參閱血清進行孵育后洗刷，再加酶物進行反響，經孵育洗刷后，加底物溶液顯色，停止反響后別離測定O.D值，挑選O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。通常老是要挑選那個O.D值稍大于1.0，而不挑選小于1.0的抗原濃度。陰性參閱血清O.D值請求<0.1-0.2。也就是請求陽性參閱血清和陰性參閱血清的O.D值有顯著差別。

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