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⑴在儀器使用前，首先連接好所需配套儀器：層析柱、恒流泵、自動部分收集器、記錄儀(色譜工作站)。將各類插頭與插座接妥(220v電源)。
⑵按下檢測儀on電源開關，電源指示燈亮，說明整臺儀器電源開始工作，然后觀察光源指示燈，如果亮了，表示光源已開始工作，整臺儀器可進入工作狀態，將檢測儀波長旋鈕旋到所需波長刻度上，把量程旋鈕撥到100%t檔(儀器預熱20分鐘，待基線平直后可加樣測試)。
⑶接通記錄儀電源開關，使電源開關撥到“通”指示燈亮。可根據記錄儀說明書調換不同的紙速度，用戶根據需要自行掌握，測量用10mv檔。此時記錄儀指針從零點開始向右移動某一刻度，調節檢測儀“光量”旋鈕使指針停留在記錄儀大約中間位置5mv左右數字顯示為50左右。。
⑷把檢測分析儀器進樣口聚乙烯塑料管接到恒流泵上，使凝膠層析柱中緩沖液流過檢測儀(恒流泵流量視凝膠層析柱大小選1-3ml/min)。用“調零”調整吸光度a值為0(量程開關撥到100%t調節光量旋鈕，使記錄儀指針在10mv數字顯示為100，即透光率為100%。把量程開關撥到“0.0”檔，緩慢調節a調零旋鈕，使記錄儀指示在“o”位，檢測儀顯示為“o”)。
⑸以上步驟結束，析系統平衡后即可用洗脫液開始洗脫樣品，洗脫前再調一次吸光度0點。洗脫過程結束前不可再調節“調零”旋鈕。當洗脫液流過檢測儀時，吸光度顯示大于零的數值，吸光度數值大小隨樣品的濃度而變化。洗脫完畢后吸光度顯示為稍大于零的數值。
⑹數字顯示吸光度和記錄儀自動繪制吸光度圖譜是兩個互相獨立的檢測系統，數字顯示吸光度與記錄儀所繪峰值大小沒有直接關系，不可互相換算。
⑺測試完畢后，必須切斷電源，并用蒸餾水清洗樣品池和聚乙烯塑料管。
注1：記錄儀光吸收a讀數
當采用10mv量程記錄儀時，記錄儀的滿量程讀數對應于a量程開關所對應的a讀數范圍。如a量程開關選定在0—0.時，則記錄儀滿量程光吸收a讀數為0.5，當記錄筆指示在記錄紙一半(50%刻度)位置時即為0.2。
注2：數字顯示光吸收a讀數(可變量程讀數模式)
當a量程開關選定在0—1.0a檔時，此時數顯板上顯示和讀數即為光吸收a的實際讀數，如顯示為080即表示為0.80a。
當a量程開關切換在其他量程位置時，則數顯光吸收a讀數為：
①a量程選定在0—2.0檔時，數顯讀數×2=實際光吸收讀數a
②a量程選定在0—1.0檔時，數顯讀數×1=實際光吸收讀數a(即直接讀數)
③a量程選定在0—0.5檔時，數顯讀數×1/2=實際光吸收讀數a
④a量程選定在0—0.2檔時，數顯讀數×1/5=實際光吸收讀數a
⑤a量程選定在0—0.1檔時，數顯讀數×1/10=實際光吸收讀數a
⑥a量程選定在0—0.05檔時，數顯讀數×1/20=實際光吸收讀數a
⑦a量程選定在0—0.02檔時，數顯讀數×1/50=實際光吸收讀數a
注3：當顯示模式開關選定固定量程讀數時，數字顯示板上的讀數為實際光吸收a讀數，該讀數將不隨a量程開關的切換而改變。(此時切換a量程開關，只改變記錄儀輸出的靈敏度，而不影響讀數和積分儀信號輸出，該功能指hd-21c-b型)
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