葡萄糖檢測(cè)試劑盒(GOD-POD微板法)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
葡萄糖(Glucose, Dextrose,Glu)又稱(chēng)玉米葡糖,簡(jiǎn)稱(chēng)葡糖,化學(xué)式C6H12O6,分子量為180.16,是自然界分布zui廣、zui重要的一種單糖,屬于多羥基醛。用酶學(xué)方法測(cè)定葡萄糖是生化檢測(cè)中的常用方法,zui常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。上述酶學(xué)法特點(diǎn)是:1、靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度均高;2、使用溫和的反應(yīng)條件;3、操作簡(jiǎn)便;4、適用于自動(dòng)分析儀。
葡萄糖檢測(cè)試劑盒(GOD-POD微板法)又稱(chēng)葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶偶聯(lián)法等,其檢測(cè)原理是在葡萄糖氧化酶的催化下,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸,同時(shí)消耗溶液中的氧,產(chǎn)生過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫與氧化色原物質(zhì)反應(yīng)生成有色化合物,初始反應(yīng)中過(guò)氧化氫的生成量與葡萄糖濃度成正比,酶標(biāo)儀進(jìn)行比色測(cè)定。本試劑盒專(zhuān)門(mén)用于人或動(dòng)物的血清、血漿、腦脊液細(xì)胞、組織等樣本中的葡萄糖含量定量測(cè)定,但不宜直接檢測(cè)尿液中的葡萄糖含量,其中Glu標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L)=90mg/dl。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
編號(hào) 名稱(chēng) | MB0711200T | MB0711500T | Storage | |
試劑(A): 酚試劑 | 30ml | 75ml | RT 避光 | |
試劑(B): 酶試劑 | 磷酸鹽緩沖液(pH7.0) | 30ml | 75ml | -20℃ 避光 |
4-氨基安替比林 | ||||
葡萄糖氧化酶 | ||||
過(guò)氧化物酶 | ||||
臨用前,按酚試劑:酶試劑=1:1混勻,即GOD-POD工作液,4℃保存。 | ||||
試劑(C): Glu標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L) | 1ml | 1ml | -20℃ | |
試劑(D): ddH2O | 1ml | 1ml | RT | |
使用說(shuō)明書(shū) | 1份 |
自備材料:
生理鹽水或PBS
96孔板或離心管、小試管
水浴鍋或恒溫箱
酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)
全自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀
操作步驟(僅供參考):
1、 樣本處理:
①血清、血漿、腦脊液樣本:從待測(cè)樣本中分理出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,直接檢測(cè),如超過(guò)線(xiàn)性范圍(25mmol/L),用生理鹽水稀釋后檢測(cè)。
②細(xì)胞樣本:
a、取適量的細(xì)胞(一般推薦>106以上),1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
b、用PBS或生理鹽水清洗1~2次,1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
c、加入200~300μl的PBS或生理鹽水勻漿,冰浴條件下超聲破碎細(xì)胞,功率300W,每次3~5s,間隔30s,重復(fù)3~5次。亦可手動(dòng)勻漿,制備好的勻漿液不可離心,待用。亦可用1~2% Triton X-100冰浴30~60min,制備好的裂解液不可離心,待用。
③組織樣本:準(zhǔn)確稱(chēng)取適量組織樣本,按質(zhì)量(g):生理鹽水或PBS(ml)=1:9的比例,加入生理鹽水或PBS,冰浴條件下手動(dòng)或機(jī)械勻漿。2500~3000g離心10min,取上清待用。
2、 普通分光光度計(jì)(2ml比色杯)Glu測(cè)定操作:
①按下表依次加入試劑:
| 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 待測(cè)管 |
ddH2O(μl) | 20 |
|
|
Glu標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L)(μl) |
| 20 |
|
待測(cè)樣本(μl) |
|
| 20 |
GOD-POD工作液(ml) | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
②充分混勻, 37℃水浴中孵育15min。
③分光光度計(jì)測(cè)定505nm波長(zhǎng)處吸光度。以空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測(cè)管的吸光度。
3、 分光光度計(jì)(1ml比色杯)、半自動(dòng)生化分析儀Glu測(cè)定操作:。
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