ELISA實(shí)驗(yàn)的應(yīng)對(duì)策略
ELISA試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在科研上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢查作用影響較大,ELISA試劑盒如不留意,有可能致使顯色不全、花板等成果。今日咱們將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)疑問(wèn)解決辦法總結(jié)于下,整理出應(yīng)對(duì)戰(zhàn)略:
挑選試劑:挑選質(zhì)量的檢查試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
標(biāo)本搜集與保留:防止運(yùn)用肉眼可見的溶血標(biāo)本、高脂標(biāo)本和混濁標(biāo)本;2-8℃下,標(biāo)本可放置24-48小時(shí),長(zhǎng)時(shí)間保留需放置-20℃下。請(qǐng)防止重復(fù)凍融。
試劑盒中會(huì)有提示,通常需求預(yù)備的有:
洗滌液;用前制造;有的試劑盒會(huì)標(biāo)明,配好的4度下通常能夠放一個(gè)月;假如沒有標(biāo)明,盡量用新鮮的,不要多制造。
顯色液(有A液和B液的),用前15分鐘制造;
規(guī)范品:有的試劑盒中規(guī)范品是現(xiàn)已制造好的,4度保留,有的是要現(xiàn)制造的,按照說(shuō)明書操作;
濃縮生物素的二抗和HRP:假如需求制造,試劑盒沒注明配好能夠保留多久的話,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用(用前15分鐘制造);
原則是:試劑盒上沒有指出制造物的貯藏方法的話,應(yīng)當(dāng)現(xiàn)配現(xiàn)用;不要怕麻煩;還有小瓶的管子開蓋前要離心,避免蓋子上粘連以后總量不行。室溫溫育的試劑,格外是溫育時(shí)間比較短的試驗(yàn)操作的試劑,加樣對(duì)數(shù)據(jù)的影響比較大,格外要留意加樣疑問(wèn)。
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