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補(bǔ)體C4溶血活性的測(cè)定(試管法)

來源:武漢貝茵萊生物科技有限公司   2010年12月02日 12:01  

將豚鼠血清用水合肼或氨水處理去除其中的C4,這種C4缺乏血清(簡(jiǎn)稱R4)不能使致敏的SRBC溶解,當(dāng)加入含有C4的受檢血清后,級(jí)聯(lián)酶促反應(yīng)發(fā)生即可導(dǎo)致致敏的SRBC溶解。溶血的程度與待測(cè)血清中C4的活性相關(guān)。

1、無補(bǔ)體C4-抗原抗體復(fù)合物(EAR4)的制備  在新鮮豚鼠血清中按每ml加0.15mol/L氨水0.25ml或0.75mol/L水合肼0.25ml,混合后置37℃水浴30~90min,滅活其中的C4。用1mol/LHCl調(diào)節(jié)至pH7.2備用,取5%SRBC懸液與等體積4U溶血素混合為EA,然后按EA4ml與R40.25ml混合,室溫放置15rain后使用;

2、在試管中加入反應(yīng)物;

3、結(jié)果判定  按CH50方法進(jìn)行。正常范圍為8.270±2.087U/ml。

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