洗刷在ELISA進程中雖不是一個反響步驟，但卻也決議著試驗的勝敗。ELSIA即是靠洗刷來到達別離游離的和的酶符號物的意圖。經過洗刷以鏟除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體的物質，以及在反響進程中非特異性地吸附于固相載體的攪擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗刷時又應把這種非特異性吸附的攪擾物質洗刷下來。可以說在ELISA操作中，洗刷是zui主要的關鍵技術，應導致操作者的高度重視，操作者應嚴厲按請求洗刷，不得大意。
洗刷的方法除某些ELISA儀器配有特別的主動洗刷儀外，手工操作有浸泡式和流水沖刷式兩種，進程如下：
（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔內反響液；b.用洗刷液過洗一遍（將洗刷液注滿板孔后，即甩去）；c.浸泡，行將洗刷液注滿板孔，放置1-2 分鐘，間歇搖動，浸泡時刻不行隨意縮短；d.吸干孔內液體。吸干應*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；e.重復操作c和d，洗刷3-4 次（或按說明規則）。在間接法中如本底較高，可增加洗刷次數或延伸浸泡時刻。微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的是疏水性的，非離子型洗刷劑既含疏水基團，也含親水基團，其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵，然后削弱蛋白質與固相載體的，并借助于親水基團和水分子的作用，使蛋白質回復到水溶液狀況，然后脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
（2）流水沖刷式 流水沖刷法開始用于小珠載體的洗刷，洗刷液僅為蒸餾水乃至可用自來水。洗刷時附接一特別裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗，繼續沖刷2 分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2 分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖刷式則比如淋浴，其洗刷作用更為*，且也簡便、迅速。已有試驗標明，流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時設法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗刷作用更佳。