對于大多數的液相色譜柱廠家而言,每根色譜柱在出庫之前都經過了測試,并存放在測試洗脫液中進行運輸。因此,在使用時,沒有必要用水進行沖洗,只要用流動相*地平衡色譜柱即可。如果使用流動相添加劑(如緩沖液或離子對試劑),建議使用含原有比例但不含這些添加劑的流動相進行中間過渡。使用10至20個色譜柱體積進行沖洗將有助于過渡到流動相。對于具有較短化學鏈(例如C8、苯基、CN)鍵合相的色譜柱,應小心確保在使用色譜柱之前對其進行*的平衡。這樣可確保重復性,并有助于防止保留時間的漂移。
正相溶劑和反相溶劑是不互溶的,這一點不能忽略。對于新購柱子,首先請注意打開分析測試說明書,了解柱子的保存溶劑。如果保存溶劑與你將要使用的流動相不互溶,請先用異丙醇過渡。過渡過程中注意因異丙醇粘度較大,會導致柱壓升高,適當調低流速。如果流動相中含有緩沖鹽類,先用不含緩沖鹽的同比例流動相過渡,避免緩沖鹽的析出。
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