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上海元析儀器有限公司

紫外可見分光光度計法測定苯酚

時間:2010-4-30 閱讀:6782
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一、實驗目的
     1、了解紫外可見分光光度計的結構、性能及使用方法
     2、熟悉定性、定量測定的方法
二、實驗原理
    紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry),又稱紫外吸收光譜法( Ultraviolet Moleculor Absorption Spectrophtometry),它是研究分子吸收190.0~1100.0nm波長范圍內的吸收光譜。紫外吸收光譜主要產生于分子價電子在電子能級間的躍遷,是研究物質電子光譜的分析方法。通過測定分子對紫外光的吸收,可以對大量的無機物和有機物進行定性和定量測定。
苯酚是一種劇毒物質,可以致癌,已經被列入有機污染物的黑名單。但在一些藥品、食品添加劑、消毒液等產品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超標,就會產生很大的毒害作用。苯酚在紫外光區的zui大吸收波長λmax=270nm。對苯酚溶液進行掃描時,在270nm處有較強的吸收峰。
定性分析時,可在相同的條件下,對標準樣品和未知樣品進行波長掃描,通過比較未知樣品和標準樣品的光譜圖對未知樣進行鑒定。在沒有標準樣品的情況下,可根據標準譜圖或有關的電子光譜數據表進行比較。
定量分析是在270nm處測定不同濃度苯酚的標準樣品的吸光值,并繪制標準曲線。再在相同的條件下測定未知樣品的吸光度值,根據標準曲線可得出未知樣中苯酚的含量。
三、儀器與試劑
1.紫外可見分光光度計
2.容量瓶(1000ml、250ml
3.比色管(50ml
4.吸量管(5ml、10ml
5.苯酚(AR
準確稱取苯酚0.010g200ml蒸餾水中,溶解后定量轉移到1000ml的容量瓶中,作為儲備液。
550ml的比色管中,用吸量管分別加入0.5 ml2ml5ml、10ml、20ml10ug/ml苯酚標準溶液,用蒸餾水定容至刻度,搖勻。
四、zui大吸收波長的選擇
在標準系列溶液中任取一種,以水為參比,分別在波長200~300nm之間以10為間隔測定其吸收波長,在吸光度zui大值附近以間隔2為單位測定,直至找到zui大吸收波長。
五、標準曲線繪制
在已篩選的zui大波長下,以水為參比分別測定上述標準溶液的吸光度,畫出C-A曲線,寫出回歸曲線方程。
六、苯酚濃度的測定
    在相同情況下,測定其吸光度。根據回歸曲線方程計算出待測苯酚濃度。
七、問題討論
1、紫外可見分光光度法的定性、定量分析的依據是什么?
2、紫外可見分光光度計的主要組成部件有哪些?
3、說明紫外可見分光光度法的特點及適用范圍。

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