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上海乾思生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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大鼠骨肉瘤細(xì)胞 atcc

時(shí)間:2015-12-14閱讀:373
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關(guān)鍵詞:大鼠骨肉瘤細(xì)胞 atcc
簡(jiǎn)介:世界*品牌大鼠骨肉瘤細(xì)胞 atcc原裝,質(zhì)量保證,*。
我公司——依托復(fù)旦大學(xué),集研發(fā)、銷售、實(shí)驗(yàn)室技術(shù)服務(wù)于一體的高科技企業(yè)。專業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)口胎牛血清、細(xì)胞因子、ELISA試劑盒、細(xì)胞、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、其產(chǎn)品吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高, 代做ELISA實(shí)驗(yàn)等。產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。全國(guó)范圍內(nèi)免費(fèi)快遞運(yùn)輸,如出現(xiàn)運(yùn)輸質(zhì)量問(wèn)題,我們可以包退換貨。
產(chǎn)品品牌:大鼠骨肉瘤細(xì)胞 atcc   
美國(guó)菌種保藏中心, 又稱美國(guó)模式菌種收集中心(ATCC),是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營(yíng)的,非贏利性組織。目前它可以提供各種動(dòng)植物細(xì)胞、標(biāo)準(zhǔn)品、菌株達(dá)兩萬(wàn)多種。
在生物制品方面,我公司是世界衛(wèi)生組織下屬生物標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)驗(yàn)室(英國(guó)生物制品檢定所NIBSC和荷蘭VQC)、歐洲藥品質(zhì)量監(jiān)察會(huì)(EDQM)在中國(guó)的進(jìn)口商,同時(shí)我部門也在代理進(jìn)口一些其他菌種保藏機(jī)構(gòu)的產(chǎn)品,比如德國(guó)國(guó)家菌種保藏中心(DSMZ)、英國(guó)國(guó)立標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏中心(NCTC)等,為國(guó)內(nèi)科研以及生產(chǎn)用戶提供細(xì)胞株、菌株等生物標(biāo)準(zhǔn)品。
收到后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。
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無(wú)菌操作注意事項(xiàng):
1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。
2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng),以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。
3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動(dòng),增加污染機(jī)會(huì)。
4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺(tái)面上用品要布局合理。
5)瓶子開(kāi)口后要盡量保持45℃斜位。
6)吸溶液的吸管等不能混用。
標(biāo)準(zhǔn)蛋白表達(dá)服務(wù) 
1. 克隆目標(biāo)蛋白編碼序列到合適的桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體上;
2. 制備重組bacmid DNA;
3. bacmid DNA轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞,制備P1和P2病毒stock;
4. P2病毒滴度測(cè)定
5. 重組蛋白表達(dá)評(píng)估和條件優(yōu)化;
6. 小規(guī)模蛋白表達(dá)和純化(500 ml培養(yǎng)物);
7. 大規(guī)模蛋白表達(dá)和純化(可選)。 
病毒制備服務(wù) 
1. 克隆目標(biāo)蛋白編碼序列到合適的桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體上;
2. 制備重組bacmid DNA;
3. bacmid DNA轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞,制備P1和P2病毒stock;
4. P2病毒滴度測(cè)定(滴度108-109);
5. 蛋白表達(dá)驗(yàn)證;
6. P3病毒制備(可選,zui多可制備3L重組桿狀病毒)。 
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

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