食源性興奮劑是指來源于食品中的興奮劑，包括一般性食品及保健食品中從生產到加工過程中天然存在或故意添加而殘留的興奮劑成分。運動員食用含有興奮劑成分的食品，不僅會對比賽公平性和個人名譽造成損害，還可能對國家的形象及食品安全聲譽造成負面影響。目前，來源于肉類食品的飲食污染、其他食品或藥物誤服而導致的食源性興奮劑困擾事件層出不窮。
興奮劑禁用清單的修訂與更新始終是WADA（世界反興奮劑機構）及我國體育運動管理部門的重要工作內容，禁用清單上所列的興奮劑種類與檢測方法不斷豐富和變化。由WADA頒布的《禁用清單 國際標準》（Prohibited List）包括S1～S9的9大類具有鎮靜、抑制或掩蔽功能的禁用藥物和3類禁用方法。2008年，北京奧運會組委會根據WADA制定的標準，依據國家認監委規定的檢測項目將食源性興奮劑劃分為4類：β2-受體激動劑類、合成類固醇類、糖皮質激素類和玉米赤霉醇類，分別對應WADA禁用清單分類的S1.蛋白同化制劑、S3. β2-激動劑和S9.糖皮質激素類。
本文采用 QSight 210 液質聯用系統建立了對48種食源性興奮劑的快速定性定量分析方法，根據保留時間及離子比率進行快速準確定性，通過定量離子色譜峰面積所制作的標準曲線進行準確定量，其檢出限完全滿足標準及相應的技術規范檢測需求，為檢測食源性興奮劑提供完整解決方案。
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實驗方法
從全部樣品中取出有代表性樣品可食部分500g，用高速粉碎機粉碎均勻，均分成兩份作為試樣和留樣，分別裝入潔凈容器中，密封并標記，于-18℃保存。
準確稱取2 g（精確至0.01 g）試樣置于50 mL具塞離心管中，加入混合同位素內標液，渦旋混勻。加入2 mL2%甲酸水溶液和陶瓷均質子高速勻漿2 min，加入8 mL甲醇:乙腈 (6:4) 渦旋震蕩5 min，4℃低溫 9000r/min離心5 min。取5 mL上清液，加入到SWCX小柱中重力自流并收集，待液體流干后加入2 mL2%甲酸水：乙腈（2:8）洗脫，抽干小柱，收集所有洗脫液。40℃氮吹至干，準確加入1 mL水超聲復溶，過0.22 μm針式過濾膜，濾液上機待分析。
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LC-MS/MS儀器方法
色譜柱：
Quasar SPP C18， 2.1×100mm，2.6μm
柱溫：35℃
流速：0.3 mL/min
進樣量：5 μL
表1 48種興奮劑化合物的液相色譜梯度洗脫表
采用珀金埃爾默 QSight 210TM 三重四極桿質譜儀進行分析，離子源參數及目標化合物質譜參數見表2和表3。
表2 質譜離子源參數
表3 正離子模式下的興奮劑類化合物及內標質譜參數列表
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表4 負離子模式下的興奮劑類化合物及內標質譜參數列表
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結果與討論
本方法采用一針進樣，通過Time Managed MRM正負切換模式同時測定48種興奮劑化合物，圖1中展示了48種化合物的MRM疊加譜圖。各個化合物的峰型對稱，并獲得優異的色譜分離效果，保證每個色譜峰上有足夠的采集點數，以便獲得準確的結果及優異的重復性。
圖1 48種興奮劑類化合物的MRM疊加譜圖（10ng/ml）
采用上述前處理步驟，用空白基質稀釋48種化合物的混合標準溶液，制成 1ng/mL?100 ng/mL 的系列校準標準溶液，并繪制標準曲線，采用內標法進行定量分析。其中各個化合物在線性范圍內，線性關系均較好，相關系數R2均大于0.990。同時考察了檢出限、定量限及6針重現性測試（見表5），實驗結果表明，該儀器方法對于測定48種化合物具有優異的線性及重現性。
表5 48種化合物的線性相關系數、重現性及檢出限結果
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結論
本方法通過簡單、方便、可靠的固相萃取前處理方法，對樣品進行提取和凈化。采用軟件已設置的興奮劑篩查方法，一鍵式實現興奮劑篩查和定量分析。經實驗表明，本方法具有良好的線性關系，靈敏度高，重現性好等特點完全滿足食源性興奮劑的篩查和定量定性分析要求。
珀金埃爾默 QSight 液質聯用儀：采用創新的離子源，保證最大的離子化，從而保證儀器的靈敏度。結合離子源主動排廢氣設計、專利的HSID質譜接口以及反吹氣設計，確保儀器處于潔凈狀態，大大提高儀器的抗污染能力，從而獲得高靈敏度，重現性好的實驗數據。
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