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前言：亞硝胺的化學(xué)式是NR 2 NO（R代表H或烴基）。大量的動物實驗已確認(rèn)，亞硝胺是強(qiáng)致癌物，并能通過胎盤和乳汁引發(fā)后代腫瘤。同時，亞硝胺還有致畸和致突變作用。人群中流行病學(xué)調(diào)查表明，人類某些癌癥，如胃癌、食道癌、肝癌、結(jié)腸癌和膀胱癌等可能與亞硝胺有關(guān)。

自2018年7月在纈沙坦原料藥中檢出N-亞硝基二jia胺（NDMA）起，陸續(xù)在其它沙坦類原料藥中也檢出了各類亞硝胺雜質(zhì)，如N-亞硝基二jia胺（NDMA）、N-亞硝基二乙胺（NDEA）等。進(jìn)一步的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在個別供應(yīng)商的非沙坦類的藥物中（如雷尼替丁、二甲雙胍），亦有亞硝胺類雜質(zhì)的檢出。因此為了保證藥品的安全和質(zhì)量可控，有必要對化學(xué)藥品中亞硝胺類雜質(zhì)進(jìn)行全面的檢測和控制。

本文基于Q Exactive超高分辨質(zhì)譜儀建立了氯沙坦中6種亞硝胺（NDMA, NMBA, NDEA, NEIPA, NDIPA, 和NDBA）分析的高靈敏度檢測方法。本方法可實現(xiàn)亞硝胺和氯沙坦主成分的有效分離，定量下限低于目前的限度要求，儀器的靈敏度高、重現(xiàn)性好，*可以滿足日常亞硝胺類基因毒性雜質(zhì)的檢測需求。

實驗方法

1.儀器與試劑

Thermo Fisher Dionex Ultimate 3000超高效液相色譜儀、ThermoFisher Q Exactive超高分辨質(zhì)譜儀、Thermo Scientific HypersilGOLD Phenyl色譜柱（P/N：25903-104630）， LCMS級甲醇（Fisher A456-4）、LCMS級水（Fisher W6-4）、LCMS級甲酸（Fisher A117-50）、 Titan3 , 17 mm PVDF過濾器，0.22µm（P/N：42213-PV）。

2.樣品前處理

2.1亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)品儲備液用純甲醇配置標(biāo)準(zhǔn)品，并用純甲醇進(jìn)行稀釋，終得到混標(biāo)中6種亞硝酸的濃度均為100 ng/mL，以此作為標(biāo)準(zhǔn)品儲備液。

2.2成品藥樣品制備

稱取適量藥片粉末至15mL離心管中，加純甲醇，渦旋1min，震蕩40mins，得到API濃度約為10mg/mL的溶液。提取后，4500rpm離心15mins，取上清液過0.22µm PVDF濾膜，濾液取至進(jìn)樣小瓶中供LCMS分析。

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