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現(xiàn)在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目，根據(jù)色譜柱的參數(shù)可以給我們提供一個初步的選擇，但由于各個儀器廠商的填料技術(shù)和鍵合技術(shù)都有差異，即使是C18液相色譜柱，同一品牌不同系列都有不同的功能，有能耐受低PH值的、耐受高溫、耐受純水相和適合堿性分離等等。所以在使用色譜柱之前需要好好閱讀產(chǎn)品說明手冊，才能找到滿意的分離條件。
C18液相色譜柱的保養(yǎng)
C18液相色譜柱的保養(yǎng)
1.色譜柱應(yīng)輕拿輕放,避免碰撞振動，放置和歸還時，相應(yīng)上機人員應(yīng)確認保存在合適的溶劑中,并確認色譜柱兩端的堵頭已旋緊。
2.色譜柱壓力升高時,應(yīng)按照“標題三”步驟進行維護，色譜柱維護應(yīng)在色譜柱檔案備注中注明。
3.當出現(xiàn)色譜柱峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰及柱效下降時。應(yīng)按照“標題四”原則進行色譜柱再生，色譜柱再生應(yīng)在色譜柱檔案備注中注明。
4.當色譜柱維護及再生后，柱效、柱壓仍然不滿足要求，則上報相關(guān)負責(zé)人，經(jīng)負責(zé)人評估后認為確需報廢的應(yīng)在色譜柱檔案中做好報廢記錄，報廢后的色譜柱應(yīng)專門存放,以便將來可以利用其填料修復(fù)被嚴重污染的色譜柱。
C18液相色譜柱
建立新化合物分離分析方法的色譜柱選擇
根據(jù)目標分析物的分子量大小、溶解性、Pka值，以及分離要求、儀器、成本等各方面來選擇色譜柱。
(1) 根據(jù)分離目的選色譜柱，對映體分離常選擇手性柱，離子化色譜可選擇離子柱，蛋白多肽、DNA可選擇凝膠柱或離子交換柱，一般的小分子化合物可選擇普通反相柱，如C18、C8柱、苯基柱等等。
(2) 根據(jù)實際需求和設(shè)備選擇填料粒徑，普通HPLC一般選擇5μm或3.5μm粒徑的色譜柱，而UPLC則常使用1.7μm——3.5μm的色譜柱。
(3) 比表面積，高比表面積有助于分離，低比表面積更適合梯度洗脫程序。
(4) 孔徑，大分子化合物適合大孔徑，在保證比表面積的前提下，選擇孔徑大的。
(5) 鍵合相的選擇
