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了解下化學發光定氮儀！
閱讀：1729 發布時間：2022-7-21
化學發光免疫分析是以標記發光劑為示蹤物信號建立起來的一種非放射標記免疫分析法，具有靈敏度高、線性范圍寬、儀器設備簡單、操作方便、分析速度快和容易實現自動化等優點。魯米諾、異魯米諾及其衍生物、吖啶酯衍生物、辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶是目前化學發光免疫分析中使用最多的標記物。
微粒子化學發光是化學發光免疫分析的特殊形式，是以化學發光劑為底物的酶免疫技術，同時應用了磁性微珠做固相載體，增加了吸附面積，使抗原抗體最大限度的結合。以3-(2-螺旋金剛烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)．苯基．1，2一二氧環乙烷(AMPPD)為發光底物在堿性磷酸酶(Alkalinephosphatase，ALP)的作用下，迅速去磷酸酶，生成不穩定的中介體AMPPD-，進而產生激發態產物，當其躍遷回到基態時產生光子。微粒子化學發光技術所需標本量極少，孵育時間大大縮減，同時因其選擇性吸附抗原，從而提高了特異性、靈敏性，使測定結果準確、可靠，并減少污染。
工作原理：
化學發光定氮儀采用化學發光檢測原理，待測樣品（或標樣）被引入到高溫裂解爐后，在1050℃左右的高溫下，樣品被*氣化并發生氧化裂解，其中的氮化物定量地轉化為一氧化氮(NO)。樣品氣經過膜式干燥器脫去其中的水份。亞穩態的一氧化氮在反應室內與來自臭氧發生器的O3氣體發生反應，轉化為激發態的NO2*。當激發態的NO2*躍遷到基態時發射出光子，光信號由光電倍增管按特定波長檢測接收。再經微電流放大器放大、計算機數據處理，即可轉換為與光強度成正比的電信號。在一定的條件下,反應中的化學發光強度與一氧化氮的生成量成正比，而一氧化氮的量又與樣品中的總氮含量成正比，故可以通過測定化學發光的強度來測定樣品中的總氮含量。
化學發光核酸探針已用于檢查病毒、細菌和原蟲的DNA。以魯米諾增強化學發光檢測體系的核酸探針主要有兩種形式，一種是用生物素標記探針，雜交后經過分離，再以過氧化物酶標記的親和素與生物素結合，加入魯米諾和增強劑后測發光。另一種是以過氧化物酶直接標記探針，用增強的魯米諾檢測發光。核酸探針亦可用吖啶酯或AP來標記，吖啶類發光體系發出的是瞬時光，而AP以AMPPD作為發光底物，其發光體系具有發光持續穩定的特點，發光時間可長達幾天，既可用發光儀也能用簡單的感光膠片檢測。