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中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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熒光分光光度計(jì)定量分析多環(huán)芳香烴(PAHs)混合物

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使用ThermoFisher Lumina熒光分光光度計(jì)定量分析多環(huán)芳香烴(PAHs)混合物

PAHs(多環(huán)芳香烴)是指具有芳香環(huán)的碳?xì)浠衔铩T撐镔|(zhì)為已知致癌物質(zhì)的誘變劑,以及煤、氣體、木材和汽車(chē)材料等有機(jī)物不*燃燒時(shí)的副產(chǎn)品。即使很小劑量的PAHs也會(huì)對(duì)身體造成嚴(yán)重傷害,因此我們必須對(duì)PAHs進(jìn)行分析,即使是微量的PAHs也應(yīng)如此。熒光分光光度計(jì)具有比吸收光譜儀更高的靈敏度,所以常被用于檢測(cè)和分析微量物質(zhì)。

熒光分光光度計(jì)通常用于在固定激發(fā)波長(zhǎng)(EX)下掃描發(fā)射波長(zhǎng)(EM)。由于混合物中含有多個(gè)熒光基團(tuán),每種熒光基團(tuán)的熒光特性各不相同(吸收、發(fā)射波長(zhǎng)各不相同)且難于區(qū)分,所以這種測(cè)量方法通常只用于檢測(cè)單一的微量熒光基團(tuán)。當(dāng)固定EX波長(zhǎng)與熒光成分的激發(fā)波長(zhǎng)相距較遠(yuǎn)時(shí),熒光物質(zhì)就不能接收到能量,從而無(wú)法產(chǎn)生熒光。

使用熒光分光光度計(jì)的同步掃描和3D掃描功能,可以對(duì)混合物中的單一組分進(jìn)行定性和定量分析。3D掃描功能可對(duì)EM和EX波長(zhǎng)范圍進(jìn)行設(shè)置,從而對(duì)整個(gè)區(qū)域進(jìn)行測(cè)量。該方法擁有良好的分辨率和靈敏度,但是測(cè)量需要花較長(zhǎng)的時(shí)間。而同步掃描是很難看到整個(gè)區(qū)域的圖譜,但優(yōu)點(diǎn)在于測(cè)量時(shí)間較短。

同步掃描是以固定EM和EX波長(zhǎng)間隔(Deltaλ)進(jìn)行掃描的一種測(cè)量方法。波長(zhǎng)掃描模式一般只移動(dòng)一個(gè)單色儀,但是同步掃描可同時(shí)移動(dòng)兩個(gè)單色儀,即同時(shí)移動(dòng)激發(fā)、發(fā)射單色儀也就是說(shuō),在同步掃描中,若Deltaλ設(shè)置為10nm,則兩個(gè)波長(zhǎng)始終保持 10nm 的間隔同時(shí)進(jìn)行移動(dòng)。例如,EM波長(zhǎng)和Ex波長(zhǎng)分別為390nm和400nm,EM波長(zhǎng)和Ex波長(zhǎng)分別為440nm和450nm。當(dāng)采用同步掃描測(cè)量時(shí),具有不同熒光特性的混合物其吸收曲線(xiàn)也會(huì)隨著不同特征波長(zhǎng)分布而發(fā)生變化,從而檢測(cè)所有可能含有的熒光基團(tuán)。

通過(guò)使用Luminous 的WaveScan軟件,該P(yáng)AHs 混合物可被分離為芴、蒽、二萘嵌苯,使用同步掃描功能可繪制出用于定量分析的校準(zhǔn)曲線(xiàn)。

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