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薄層色譜儀的條件選擇

閱讀:868      發(fā)布時(shí)間:2022-3-4
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 ⑴固定相選擇

柱色譜中提到的吸附劑都可以用作為薄層色譜的固定相,分離性能及使用選擇同柱色譜的選擇原則相同(各種吸附劑見柱色譜表1)。

一般用于薄層色譜時(shí),要求吸附劑的粒度更小。商品吸附劑區(qū)分為色譜級(用于柱色譜)和薄層色譜級(用于薄層色譜)。

⑵展開劑選擇

薄層色譜展開劑的選擇和柱色譜一樣,主要根據(jù)樣品中各組分的極性、溶劑對于樣品中各組分溶解度等因素來考慮。展開劑的極性越大,對化合物的洗脫力也越大。(各種溶劑極性見柱色譜表2)。

選擇展開劑時(shí),除參照表列溶劑極性來選擇外,更多地采用試驗(yàn)的方法,在一塊薄層板上進(jìn)行試驗(yàn):

①若所選展開劑使混合物中所有的組分點(diǎn)都移到了溶劑前沿,此溶劑的極性過強(qiáng);

②若所選展開劑幾乎不能使混合物中的組分點(diǎn)移動(dòng),留在了原點(diǎn)上,此溶劑的極性過弱。

當(dāng)一種溶劑不能很好地展開各組分時(shí),常選擇用混合溶劑作為展開劑。先用一種極性較小的溶劑為基礎(chǔ)溶劑展開混合物,若展開不好,用極性較大的溶劑與前一溶劑混合,調(diào)整極性,再次試驗(yàn),直到選出合適的展開劑組合。合適的混合展開劑常需多次仔細(xì)選擇才能確定。

⑶相對移動(dòng)值

從點(diǎn)樣原點(diǎn)開始到展開后的溶劑前沿,是溶劑的移動(dòng)距離,記為lo,混合物中各組分的移動(dòng)距離分別記為l1,l2,l3 …(移動(dòng)值示意圖)。

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在不同的展開條件下,各化合物的移動(dòng)距離不會(huì)相同,而在同一條件下,相對于展開劑的移動(dòng)距離,各化合物有可比較的展開數(shù)據(jù),稱為相對移動(dòng)值,或比移值:

Rf=li/lo

在相同條件下測得的比移值可以用于化合物的薄層色譜特征值進(jìn)行比較對照。

⑷顯色

分離的化合物若有顏色,很容易識(shí)別出來各個(gè)樣點(diǎn)。但多數(shù)情況下化合物沒有顏色,要識(shí)別樣點(diǎn),必須使樣點(diǎn)顯色。通用的顯色方法有碘蒸氣顯色和紫外線顯色。

①碘蒸氣顯色:將展開的薄層板揮發(fā)干展開劑后,放在盛有碘晶體的封閉容器中,升華產(chǎn)生的碘蒸氣能與有機(jī)物分子形成有色的締合物,完成顯色。

②紫外線顯色:用摻有熒光劑的固定相材料(如硅膠F,氧化鋁F等)制板,展開后在用紫外線照射展開的干燥薄層板,板上的有機(jī)物會(huì)吸收紫外線,在板上出現(xiàn)相應(yīng)的色點(diǎn),可以被觀察到。

有時(shí)對于特殊有機(jī)物使用專用的顯色劑顯色。此時(shí)常用盛有顯色劑溶液的噴霧器噴板顯色。 

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