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北京諾博萊德科技有限公司
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當(dāng)前位置:北京諾博萊德科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>核酸提取>> 40114CTAB植物基因組DNA快速ti取試劑盒 核酸提取

CTAB植物基因組DNA快速ti取試劑盒 核酸提取

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)40114

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地北京市

更新時(shí)間:2025-04-21 10:39:14瀏覽次數(shù):71次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次/100次/200次
貨號(hào) 40114 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 改進(jìn)的經(jīng)典 CTAB 植物 DNA 抽提液內(nèi)
裂解液 PL、結(jié)合液 PQ 或者抑制物去除液 IR 低溫時(shí)可能出現(xiàn)析出和沉淀,可以在 55℃水浴幾分鐘幫助重新溶解,恢復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用。
CTAB植物基因組DNA快速ti取試劑盒 核酸提取

諾博萊德 CTAB植物基因組DNA快速提取試劑盒(離心柱型)


CTAB植物基因組DNA快速ti取試劑盒 核酸提取


目錄號(hào):40114

目錄編號(hào)

包裝單位

40114-50

50次

40114-100

100次

40114-200

200次

適用范圍

適用于快速提取植物基因組DNA

試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性

本試劑盒在室溫儲(chǔ)存 12 個(gè)月不影響使用效果。

儲(chǔ)存事項(xiàng):

1. 裂解液 PL、結(jié)合液 PQ 或者抑制物去除液 IR 低溫時(shí)可能出現(xiàn)析出和沉淀,可以55℃水浴幾分鐘幫助重新溶解,恢復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用。

2.避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化,各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)


產(chǎn)品介紹

改進(jìn)的經(jīng)典 CTAB 植物 DNA 抽提液內(nèi)(添加多種針對(duì)植物特點(diǎn)的多糖、多fen去除成份)迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸mei,lv仿抽提后通過離心清除多糖、多酚和蛋白質(zhì)(根據(jù)需要,上清中還加入異丙chun離心沉淀基因組 DNA,進(jìn)一步去除其它各種雜質(zhì),然后基因組 DNA 在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟, 進(jìn)一步將多糖、多fen和細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,zui后低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。

產(chǎn)品特點(diǎn)

 1.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好。克服了國(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。

 2.不需要使用有毒的苯fen等試劑,也不需要乙chun沉淀等步驟。快速,簡(jiǎn)捷,單個(gè)樣品操作一般可在 1 小時(shí)內(nèi)完成。

 3.數(shù)種去多糖、多fen成份和多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280 典型的比值達(dá)

 4.1.7~1.9,長(zhǎng)度可達(dá) 30 kb -50kb,可直接用于 PCR,Southern-blot 和各種mei切反應(yīng)

注意事項(xiàng):

 1.所有的離心步驟均在室溫完成,使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13,000rpm的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī),如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。

 2.開始實(shí)驗(yàn)前將需要的水浴先預(yù)熱到65℃?zhèn)溆谩?/span>

 3.需要自備lv仿/異戊chun(體積比24:1混合)、無水乙chun和β-巰基乙chun。

 4.結(jié)合液PQ 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作時(shí)要戴乳膠手套,避免沾染皮膚、眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí),要用大量清水或者生理鹽水沖洗。

 5.不同來源的植物組織材料中提取DNA 的量會(huì)有差異,一般100mg新鮮組織典型產(chǎn)量可達(dá)3-25μg。洗脫液EB不含有螯合劑EDTA, 不影響下游mei切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫, 但應(yīng)該確保pH大于7.5, pH過低影響洗脫效率。用水洗脫DNA應(yīng)該保存在-20℃。DNA如果需要長(zhǎng)期保存,可以用TE緩沖液洗脫 (10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影響下游mei切反應(yīng),使用時(shí)可以適當(dāng)稀釋。        

 標(biāo)準(zhǔn)操作步驟:(實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)先閱讀注意事項(xiàng))提示:

  第一次使用前請(qǐng)先在漂洗液 WB 和結(jié)合液 PQ 中加入zhi定量的無水乙chun,充分混勻,加入后請(qǐng)及時(shí)在方框打鉤標(biāo)記已加入乙chun,以免多次加入!

 取所需適量裂解液 PL 放置在 65℃預(yù)熱,使用前加入 β-巰基乙chun到終濃度 2%。

 1.取適量植物組織(新鮮組織 100 mg 或干重組織 30 mg)在研缽中加入液氮充分碾磨成細(xì)粉。

 2.轉(zhuǎn)移細(xì)粉到一個(gè) 1.5ml 離心管,不要解凍,加 600μl 65℃預(yù)熱的裂解液 PL (確認(rèn)已加入 β-巰基乙chun至 2%),劇烈渦旋振蕩混勻,用大口徑槍頭輕柔吹打幫助裂解。

(如果組織裂解困難,可根據(jù)需要加一個(gè)輕柔勻漿 10 秒的步驟幫助裂解。)

 3.65℃水浴 20-60 分鐘,在水浴過程中顛倒離心管以混合樣品數(shù)次。

(可選:如果組織干燥或者產(chǎn)量低,可以適當(dāng)延長(zhǎng)水浴時(shí)間。如果 RNA 殘留多,可在水浴前加入 6μl RNA mei(20mg/ml)。)

 4.加入 700μl lv仿/異戊chun(體積比 24:1 混合),顛倒充分混勻幾分鐘(或者渦旋混勻),13,000rpm 離心 5 分鐘。

(若提取的植物組織富含多糖多fen,可以在第4步前用等體積fen/lv仿(1:1)抽提一遍。)

 5.小心吸取上清到一個(gè)新的1.5ml離心管,注意不要吸到界面物質(zhì)。

(如上清比較渾濁,則需要重復(fù)步驟4一遍,直到得到透亮上清。)

 6.較精確估算上清量,加入1.5 倍體積結(jié)合液PQ(請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙chun!)后立刻渦旋,充分混勻。此時(shí)可能出現(xiàn)沉淀,但不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 7.將上一步所得混合物(包括可能出現(xiàn)的沉淀)加入一個(gè)DNA吸附柱中,(吸附柱放入收集管中)13,000rpm離心30秒,倒掉收集管中的廢液(先加700μl離心,棄廢液,再加入剩余的溶液,再次離心)。

 8.加入500μl 抑制物去除液IR,12,000rpm 離心30秒,棄廢液。

 9.加入700μl漂洗液WB(請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙chun!),12,000rpm離心30秒,棄掉廢液。

 10.加入 500μl 漂洗液 WB,12,000rpm 離心 30 秒,棄掉廢液。

 11.將 DNA 吸附柱放回空收集管中,13,000rpm 離心 2 分鐘,盡量除去漂洗液, 以免漂洗液中殘留乙chun抑制下游反應(yīng)。

 12.取出 DNA 吸附柱,放入一個(gè)干凈的離心管中,在吸附膜的中央加100μl 洗脫緩沖液EB(洗脫緩沖液事先在 65-70℃水浴中預(yù)熱),室溫放置 3-5 分鐘,12,000rpm離心1分鐘。將得到的溶液重新加入離心吸附柱中,室溫放置2分鐘,12,000rpm離心 1 分鐘。

(洗脫體積越大,洗脫效率越高,如果預(yù)計(jì)和需要產(chǎn)量高,可增大洗脫體積,如果需要 DNA 濃度較高,可以適當(dāng)減少洗脫體積,但是zui小體積不應(yīng)少于 50μl,體積過小降低 DNA 洗脫效率,減少DNA產(chǎn)量。)

 13.DNA可以存放在 2-8℃,如果要長(zhǎng)時(shí)間存放,可以放置在-20℃。

附錄(低DNA含量或者產(chǎn)量低樣品操作步驟):

 1.取適量植物組織(新鮮組織 400 mg 或干重組織 200 mg)在研缽中加入液氮充分碾磨成細(xì)粉。

 2.轉(zhuǎn)移細(xì)粉到一個(gè) 15ml 離心管,不要解凍,加入 9ml 65℃預(yù)熱的裂解液 PL (確認(rèn)已經(jīng)加入 β-巰基乙chun至 2%),劇烈渦旋振蕩混勻,用大口徑槍頭吹打幫助裂解。

(如果組織裂解困難,可根據(jù)需要加一個(gè)輕柔勻漿 10 秒的步驟幫助裂解。)

 3.室溫放置 60 分鐘,中間不時(shí)顛倒離心管以混合樣品數(shù)次。

(如果組織干燥或者產(chǎn)量低,可以放置在 65℃水浴。)

 4.加 4.5ml lv仿/異戊chun(體積比 24:1 混合),渦旋充分混勻,3,000g 離心 10 分鐘。

 5.小心吸取上清到一個(gè)新的 15ml 離心管,注意不要吸到界面物質(zhì)。重復(fù)一遍步驟 4。

 6.小心吸取上清到一個(gè)新的 15ml 離心管,估算上清量,加入 0.7 倍體積的異丙chun,渦旋混勻來沉淀


CTAB植物基因組DNA快速ti取試劑盒 核酸提取





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