諾博萊德 組蛋白提取試劑盒

組蛋白提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號：P4950

產(chǎn)品名稱：組蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：組蛋白提取試劑盒

規(guī)格：50T ; 100T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

NobleRyder P4950 組蛋白提取試劑盒

組蛋白提取試劑盒提供了一種簡單而應用廣泛的方法以及相應的試劑提取組蛋白。適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取組蛋白。提取過程簡單方便。組蛋白提取產(chǎn)物的產(chǎn)量大約0.4mg每107個細胞或100mg組織，不同的細胞和組織中，產(chǎn)量差異很大。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、組蛋白修飾實驗比如乙酰化、甲基化、sumoylation等下游蛋白研究。

適用樣本：動物細胞/組織

使用前請注意：

1. 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以 2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

2. 蛋白酶抑制劑在 2-8℃低溫時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

3. 試劑拆封后請盡快使用完！

產(chǎn)品介紹：

組蛋白提取試劑盒提供了一種簡單而應用廣泛的方法以及相應的試劑 提取組蛋白。適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取組蛋白。提取過程簡單方便。

組蛋白提取產(chǎn)物的產(chǎn)量大約 0.4mg 每 107 個細胞或 100mg 組織，不同的細胞和組織中，產(chǎn)量差異很大。

提取的蛋白可用于 Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、組蛋白修飾實驗比如乙酰化、甲基化、sumoylation等下游蛋白研究。

自備試劑和儀器：

離心機、振蕩器、勻漿機/勻漿器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS 緩沖液、蛋白定量試劑盒，離心管、吸頭、一次性手套。

產(chǎn)品特點：

1. 使用方便，從細胞，組織中提取蛋白不需經(jīng)過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。

2. 提取過程簡單方便。

3. 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。

4. 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。

5. 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含 6 種獨立的蛋白酶抑制劑，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

操作步驟：

一、使用注意事項

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得優(yōu)良實驗效果

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3. 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

4. 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

5. 如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

6. 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

7. 下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，注意提取過程保持低溫操作，縮短離心時間。

8. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

9. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。

二、細胞組蛋白提取

1. 提取液制備：

每 500μL 蛋白提取液 A 中加入 2μL 蛋白酶抑制劑混合物混勻后置冰上備用。

2. 收集 5-10×106個細胞，在 4℃，1000×g 條件下離心 5-10min，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干。

3. 用冷 PBS 洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

4. 每 5-10×106 個細胞中加入 500μL 冷的蛋白提取液 A，混勻后，在 4℃條件下輕輕振蕩 10min。

5. 在 4℃，16000×g 條件下離心 15min，棄上清。

6. 沉淀中加入 100μL 組蛋白提取液 B。

7. 用 200μL 槍頭反復吹打混勻或充分渦旋振蕩混勻。

8. 置 4℃冰箱過夜存放。

9. 16000×g 條件下離心 10min，收集上清。

10. 在上清中加入 10-25μL 試劑 C 充分混勻。

11. 加入上樣緩沖液混勻后煮沸，分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/span>

三、組織組蛋白提取

1. 提取液制備：

每 500μL 蛋白提取液 A 中加入 2μL 蛋白酶抑制劑混合物混勻后置冰上備用。

2. 取 100mg 組織樣本剪碎，加入蛋白提取液 A，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。

3. 將組織勻漿吸入一預冷的干凈離心管中，在 4℃條件下輕輕振蕩 10min。

4. 在 4℃，16000×g 條件下離心 15min，棄上清。

5. 沉淀中加入 100μL 組蛋白提取液 B。

6. 用 200μL 槍頭反復吹打混勻或充分渦旋振蕩混勻，置 4℃冰箱過夜存放。

7. 16000×g 條件下離心 10min，收集上清。

8. 在上清中加入 25μL 試劑 C 充分混勻。

9. 加入上樣緩沖液混勻后煮沸，分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/span>

注意事項：

1. 本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

3. 實驗完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

5. 如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應立即用水沖洗。

組蛋白提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

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