植酸（Saponin ）含量試劑盒說(shuō)明書(shū)

微量法 100 管/96 樣

植酸Saponin含量試劑盒 其他系列

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

植酸又稱肌酸、環(huán)己六醇六全-二氫磷酸鹽，它主要存在于植物的種子、根干和莖中，其中以豆科植物的種子、谷物的麩皮和胚芽中含量最高。植酸作為螯合劑、抗氧化劑、保鮮劑、水的軟化劑、發(fā)酵促進(jìn)劑、金屬防腐蝕劑等，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、油漆涂料、日用化工、金屬加工、紡織工業(yè)、塑料工業(yè)及高分子工業(yè)等行業(yè)領(lǐng)域。

測(cè)定原理：

磺基水楊酸-氯化鐵溶液顯紫紅色，在 500nm 下有最大吸光值。在 pH6.0-6.5 的環(huán)境下，植酸和鐵離子結(jié)合使溶液顏色變淡，測(cè)定吸光度的降低來(lái)檢測(cè)植酸含量。

試劑的組成和配制：

需自備儀器和用品：

酶標(biāo)儀、烘箱、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96 孔板、金屬震蕩儀、蒸餾水

植酸提取：

樣本烘干，粉碎過(guò)篩，稱取 0.05g，加入 1ml 試劑一，震蕩提取 2h；8000g，25℃離心 10min，取上清 0.5ml，加入 0.5ml 試劑二，混勻后 4℃靜置 2h，離心取上清待測(cè)。

測(cè)定步驟：

1、酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 500nm。

2、測(cè)定管：取 100μl 上清，加入 900μl 試劑三，混勻后取 150μl 加入 96 孔板，再加入 50μl 試劑四，充分混勻后 500nm 下測(cè)定吸光值A(chǔ)1。

3、空白管：取 100μl 蒸餾水，加入 900μl 試劑三，混勻后取 150μl 加入 96 孔板，再加入 50μl 試劑四，充分混勻后 500nm 下測(cè)定吸光值A(chǔ)2。計(jì)算ΔA=A2-A1。

空白管只要做一管。

植酸含量計(jì)算：

標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線為：y = 2.0284x + 0.0096，R2 = 0.993；X 為植酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml），y 為吸光值ΔA(A2-A1)。

植酸含量(mg/g 干重)=（ΔA-0.0096）÷ 2.0284×V 反總÷V 樣÷(W÷V 樣總)

=9.86×（ΔA-0.0096）÷W

V 反總：測(cè)定液總體積，1ml；V 樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1ml； V 樣總：加入提取液總體積，2ml；W：樣本干重，g。

注意事項(xiàng)：

若ΔA 高于 0.2，說(shuō)明樣本植酸濃度過(guò)高，需要加蒸餾水適當(dāng)稀釋，并在計(jì)算結(jié)果中乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

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