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供貨周期	現貨	規格	1×10^6
貨號	BH3547	應用領域	醫療衛生,生物產業,制藥/生物制藥

EA.hy926人臍靜脈細胞融合細胞

背景描述在PEG脅迫下，將原代培養的人臍靜脈細胞與抗硫鳥嘌呤的A549克隆株融合，構建了人臍靜脈細胞株, EA.hy926。融合子在HAT培養基上生長并以八因子相關抗原篩選。EA.hy926已經過100次以上的群體倍增(PDLs)。電鏡照片顯示Weibel-Palade小體的細胞質分布以及組織特異性的細胞器，分化的內皮細胞特性如血管生成，體內平衡/血栓形成，血壓及炎癥反應。 [PubMed: 6407019]

培養條件準備DMEM (含NaHCO3 1.5g/L）培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗1%。

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%

細胞特征來源：體細胞融合細胞

形態：內皮細胞樣，貼壁生長

凍存條件無血清凍存液。

細胞檢測不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等

供應限制僅供科研使用

運輸方式常溫或凍存（T25瓶或者1mL凍存管包裝）

注意事項細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的專用培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

1）凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL專用培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，專用培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml專用培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1.吸去培養液，加PBS清洗1-2遍，去PBS。加入0.25%胰酶2ml消化15秒，去胰酶。將培養瓶放37度培養箱，靠殘余胰酶繼續消化細胞3-10分鐘直至細胞變圓（每3分鐘觀察一次。）

2.加12ml專用培養基，吹打均勻，即可分到2個T25培養瓶里。（細胞1傳2，若顧客使用培養皿或培養孔板，建議先包被）

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。下面T25瓶為例；

1.細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

2.1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。

3.將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的專用培養基來培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1：2傳代。

上海語純生物科技有限公司，是由具有優良生命科學、生物技術背景人員共同創辦的技術企業。公司專注于原代細胞、腫瘤細胞及細胞培養相關試劑產品，為高校、食品、醫藥、生物研究等領域提供相關技術支持和服務。

公司自成立以來通過不斷地科技創新，產品研發，已為客戶提供定制化細胞產品以及完整的細胞培養解決方案，通過積極地探索、研發、深化和豐富產品，目前基礎培養基產品種類多達200多種，細胞系300多種，原代細胞接近600種。我們始終以“發展科學技術，關愛公眾生命健康"為動力，通過技術創新，廣泛吸納高科技人才，不斷完善產品體系、豐富產品鏈，積極拓展市場，擴充應用領域，，建立了具有市場競爭力的“語純"品牌。

注意事項

1、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作；

2、為保持本產品的優良使用效果，請務必按照建議的儲存條件進行保存；

3、本產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療。

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