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如果沒有限制性內切酶，當今的分子生物學研究會是個什么樣子？40多年來，限制性內切酶這個幕后成員默默推動著許多基礎生物學研究和商業化應用。限制性內切酶（又稱限制酶）首先是在細菌體內發現的，但后來在部分古細菌中也發現了這種成分。通常，限制性內切酶會切割雙鏈DNA。每個限制性內切酶會識別特定的DNA序列，根據不同的內切酶類型，可在識別序列內或距識別序列不遠的位置處切割DNA。識別序列長度通常為4-8 bp，酶切之后會形成粘性末端（5'或 3'突出端）或平末端（圖1.1.1）。