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儀表功能檢測(cè) 1. 將儀表與充電器斷開(kāi)； 2. 將STX04測(cè)試電極（具有較短電線的電極）與儀表連接： 將電極末端的插頭插入儀表上的INPUT接口； 3. 開(kāi)關(guān)打到ON，選擇模式Ohms （Ω）； 4. 此時(shí)儀表讀數(shù)應(yīng)顯示應(yīng)為1000Ω，如果不是，用3/32”扁 平頭螺絲刀調(diào)節(jié)R Adj旋鈕，直到讀數(shù)顯示為1000Ω； 5. 將模式調(diào)到Millivolts，儀表讀數(shù)應(yīng)顯示為0。 平衡電極 用Millicell ERS-2系統(tǒng)進(jìn)行電阻測(cè)量時(shí)，可以直接使用電極而不需要平衡。當(dāng)進(jìn)行電壓測(cè)量時(shí)，STX01 電極需要進(jìn)行平衡。 平衡時(shí)，準(zhǔn)備與測(cè)量溶液相似的電極溶液，或者使用PBS緩沖液，0.15MNaCl或0.1MKCl溶液。 1. 將Millicell ERS-2 儀表與充電器斷開(kāi)； 2. 將STX01電極與儀表連接：將電極末端插頭插入儀表上的INPUT接口； 3. 開(kāi)關(guān)打到OFF，模式打到Ohms （Ω），將電極浸入電極緩沖液；下表列出了推薦的平衡時(shí)間： 電極狀態(tài) 浸入溶液時(shí)間 從未被測(cè)試 24h 干燥儲(chǔ)存 24h 在溶液中儲(chǔ)存 2h 4. 進(jìn)行電極功能檢測(cè)。 電極功能檢測(cè)（僅測(cè)量電壓時(shí)需要） 1. 如果電極是*次使用，或者干燥儲(chǔ)存后使用，請(qǐng)***行電極平衡； 2. 將儀表與充電器斷開(kāi)，模式調(diào)到Millivolts； 3. 將電極頭部浸入與培養(yǎng)基相似的電極液中（或者0.1-0.15MNaCl/KCl溶液）； 4. 打開(kāi)開(kāi)關(guān)到ON； 5. 如果儀表顯示為0，表示電極可以進(jìn)行電壓測(cè)量了。 在超凈臺(tái)中準(zhǔn)備如下物品 1. *充好電的Millicell ERS-2系統(tǒng) 2. STX04測(cè)試電極 3. STX01或者STX03電極 （用于檢測(cè)Millicell 6, 12和24孔板）, STX00電極（用于檢測(cè)Millicell 96孔板）, （如果要測(cè)量電壓則要***行電極平衡） 4. 未培養(yǎng)細(xì)胞的Millicell培養(yǎng)皿（對(duì)照） 5. 培養(yǎng)了細(xì)胞的Millicell培養(yǎng)皿 6. 70%的乙醇 7. 3/32”平頭螺絲刀 電極滅菌 電極是非無(wú)菌的，我們建議使用乙醇滅菌，也可以用環(huán)氧乙烷、紫外線或者殺菌劑滅菌。不能使用高 溫或者火焰滅菌，因?yàn)殡姌O無(wú)法承受高溫。乙醇滅菌流程如下： 1. 將電極插入70%乙醇浸泡15min進(jìn)行滅菌，取出電極風(fēng)干15秒； 注意：不能將電極浸入乙醇中超過(guò)30min，這會(huì)損壞電極的保護(hù)層，縮短其使用壽命。 2. 用與培養(yǎng)基相似的電極液（或者0.1-0.15MNaCl/KCl）沖洗電極； 3. 若是進(jìn)行電阻測(cè)量，此時(shí)電極已可以使用； 4. 若是進(jìn)行電壓測(cè)量，將電極在與培養(yǎng)基相似的無(wú)菌電極緩沖液中平衡15分鐘。 注意：為了保持無(wú)菌，可以將電極放在紫外燈下短時(shí)間照射。 電阻測(cè)量 注意：雖然儀表量程能夠達(dá)到13,000Ω，但是10,000Ω及以下的讀數(shù)才具 有準(zhǔn)確性。 1. 將細(xì)胞置于室溫下平衡30分鐘； 2. 如前所述，測(cè)試Millicell ERS-2系統(tǒng)； 3. 確保儀表與充電器斷開(kāi)； 4. 將模式打到Ohms，開(kāi)關(guān)打到ON； 5. 將電極短端浸入培養(yǎng)板內(nèi)部，長(zhǎng)端浸入外部。短端不要碰到膜上生 長(zhǎng)的細(xì)胞，長(zhǎng)端不要碰到外側(cè)的底部。為了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定和可重復(fù)性， 確保電極平穩(wěn)，并與培養(yǎng)板成90°； 6. 記錄電阻值。 空白電阻測(cè)量 1. 把電極置入空白的杯中（比如如沒(méi)有培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)板）； 2. 按照電阻測(cè)量步驟5中的方法測(cè)量空白杯中的電阻值。 電阻計(jì)算 1. 組織電阻 用含細(xì)胞的培養(yǎng)板測(cè)出的電阻減去空白電阻，就是真正的組織電阻 2. 單位面積電阻 電阻與組織面積成反比。膜越大，電阻越低。 注意：24mm或更大直徑培養(yǎng)板的電阻值不應(yīng)該換算成單位面積電阻，因?yàn)镾TX電極不能在一個(gè)相對(duì)大的膜 面積內(nèi)產(chǎn)生均一的電流密度。 單位面積電阻用真實(shí)組織電阻乘以有效表面積即可，單位是Ωcm2。有效膜面積在下表中列出。 單位面積電阻=電阻（Ω）×有效膜面積（cm2） 單位面積=1cm2 單位面積電阻與膜面積無(wú)關(guān)，12mm及以下培養(yǎng)板上獲得的數(shù)據(jù)可以用來(lái)比較。 Millicell插入式細(xì)胞培養(yǎng)皿與培養(yǎng)板有效膜面積 產(chǎn)品類(lèi)型 直徑（mm） 膜面積（cm2） 6-well 站立式培養(yǎng)皿 30 4.2 24-well站立式培養(yǎng)皿 12 0.6 6-well 懸掛式培養(yǎng)皿 24 4.5 12-well懸掛式培養(yǎng)皿 12 1.1 24-well懸掛式培養(yǎng)皿 6.5 0.3 24-well 培養(yǎng)板 10 0.7 96-well 培養(yǎng)板 4 0.11 電壓測(cè)量 1. 將細(xì)胞置于室溫下平衡30分鐘； 2. 如前所述，測(cè)試Millicell ERS-2系統(tǒng)，并確保電極經(jīng)過(guò)平衡； 3. 將模式調(diào)到Millivolts，開(kāi)關(guān)打到ON； 4. 將電極短端浸入培養(yǎng)皿內(nèi)部，長(zhǎng)端浸入外部。短端不要碰到膜上生 長(zhǎng)的細(xì)胞，長(zhǎng)端不要碰到外側(cè)的底部。為了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定和可重復(fù)性， 確保電極平穩(wěn)，并與培養(yǎng)板成90°； 5. 記錄電壓值； 注意：在幾次測(cè)量之間，為了避免樣品交叉需要沖洗電極，請(qǐng)用培養(yǎng)液 沖洗，而不是蒸餾水。 儀表 不用的時(shí)候，儀表應(yīng)該與充電器保持連接，電池會(huì)處于持續(xù)充電狀態(tài)，可以隨時(shí)使用。儀表大約可使 用8小時(shí)，當(dāng)電量很弱時(shí)會(huì)自動(dòng)關(guān)機(jī)以避免對(duì)儀器造成損害。 注意：為了避免腐蝕，不要將生理鹽水或者培養(yǎng)液濺到或潑到儀表上。 電池更換 Millicell ERS-2配備了一個(gè)6V 220 mAh可充電NiMH電池，可重復(fù)充電約500次。電池可在任何放電狀 態(tài)充電，可持續(xù)充電而不造成損害。 注意：為了避免對(duì)電池造成損害，請(qǐng)只使用配備的充電器充電 根據(jù)使用情況，電池壽命約為1到2年，NiMH電池不使用時(shí)也是持續(xù)放電的。為了防止電池自放電，***少 每?jī)蓚€(gè)月給電池充一次電。 電極保存 1. 短時(shí)間存放（少于兩周）：用于電阻測(cè)量，干燥存放即可。用于電壓測(cè)量存放，將電極浸入電極液中。 將電極電纜插頭與儀表連接，系統(tǒng)內(nèi)部就短路了，電極的平衡得以維持。 2. 長(zhǎng)時(shí)間存放（多于兩周）：用Milli-Q水沖洗去除鹽及蛋白質(zhì)，并在干燥避光處保存。 電極清洗 1. 用浸有70%乙醇的棉簽輕輕擦拭電極頭部； 2. 如需進(jìn)一步清洗，將電極頭部放在未稀釋的家用漂白劑里3分鐘。不要讓漂白劑接觸到頭部以上部位。 然后立刻用水沖洗； 3. 砂紙打磨（僅當(dāng)電壓測(cè)量時(shí)）：用提供的深藍(lán)色砂紙輕輕擦拭電壓電極（位于電極頭部附近表面內(nèi)部 的兩個(gè)銀色芯片），不要擦拭頭部外側(cè)的銀色芯片。